慢性溫和非預(yù)期性應(yīng)激誘導(dǎo)C3H-HeJ鼠皮膚組織免疫紊亂和細(xì)胞凋亡.pdf

1、目的：⑴建立慢性溫和非預(yù)期性應(yīng)激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型,觀察慢性溫和非預(yù)期性應(yīng)激對(duì)C3H/HeJ鼠皮膚組織的影響。⑵研究小鼠皮膚組織中免疫相關(guān)細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β、IL6和細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2在心理應(yīng)激過(guò)程中的變化。⑶探討心理應(yīng)激誘導(dǎo)皮膚組織免疫紊亂和細(xì)胞凋亡的機(jī)制,為治療斑禿疾病提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：①采用C3H/HeJ雌鼠建立C

2、UMS模型,與對(duì)照組(Control組)比較,觀察心理應(yīng)激組小鼠體重和行為學(xué)變化以及心理應(yīng)激對(duì)小鼠皮膚組織的影響。②在上述實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上加入腹腔注射抗氧化劑組,把所有實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分成 Control組、CUMS組和CUMS+抗氧化劑組(Tempol組)三組。在施加21天心理應(yīng)激后,對(duì)三組小鼠進(jìn)行體重測(cè)量和行為學(xué)評(píng)估,檢測(cè)小鼠血漿皮質(zhì)酮水平,觀察小鼠皮膚組織學(xué)切片,用免疫組織化學(xué)染色的方法觀察皮膚組織中免疫相關(guān)細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β、

3、IL6的表達(dá)并用Elisa試劑盒進(jìn)行定量檢測(cè),再用Western Blot方法檢測(cè)皮膚組織中凋亡相關(guān)蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴小鼠體重變化:與Control組相比,CUMS組和Tempol組的小鼠體重顯著降低(P<0.01);Tempol組的小鼠體重相對(duì)于CUMS組也有明顯降低(P<0.05)。⑵行為學(xué)評(píng)估:在3分鐘曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中,CUMS組與Tempol組小鼠的總運(yùn)動(dòng)距離和修飾行為次數(shù)明顯少于 Control組小鼠

4、(P<0.01),靜止時(shí)間明顯多于Control組小鼠(P<0.01)。⑶血漿皮質(zhì)酮:CUMS組與Tempol組小鼠的血漿皮質(zhì)酮含量顯著高于Control組小鼠(P<0.01)。⑷CUMS組小鼠皮膚組織中出現(xiàn)了大量炎性細(xì)胞聚集現(xiàn)象,Tempol組和 Control組小鼠只有少量聚集或者沒(méi)有出現(xiàn)。⑸免疫相關(guān)細(xì)胞因子:CUMS組小鼠皮膚組織中免疫相關(guān)細(xì)胞因子TNF-α、IL1β、IL6的含量顯著高于Control組小鼠(P<0.05)與Te

5、mpol組小鼠(P<0.05)。⑹細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白:CUMS組小鼠皮膚組織中促凋亡蛋白Bax的表達(dá)量顯著高于Control組小鼠(P<0.05)與Tempol組小鼠(P<0.05),三組小鼠皮膚組織中抑凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)量無(wú)顯著差異。
　　結(jié)論：①慢性溫和非預(yù)期性應(yīng)激模型是研究疾病發(fā)生機(jī)制中心理因素作用的最適宜模型。②慢性溫和非預(yù)期性應(yīng)激誘導(dǎo)了C3H/HeJ鼠皮膚組織的免疫紊亂,造成TNF-α、IL-1β、IL6等免疫細(xì)胞因