C3G基因對H9C2心肌細胞凋亡和增殖的影響.pdf

1、目的：探討 C3G基因對 H9C2心肌細胞凋亡、增殖的影響及其機制。
　　方法：設計 RNA干擾序列、購買 pCXN2-Flag質粒（空質粒）及pCXN2-Flag-hC3G(過表達人C3G mRNA)質粒，分別用空白試劑、陰性慢病毒、C3G siRNA慢病毒、C3G siRNA慢病毒+空質粒、C3G siRNA慢病毒+過表達人C3G質粒隨機感染和轉染H9C2心肌細胞；實驗被隨機分為5個組，即空白對照組、陰性對照組、沉默C3G組、

2、沉默C3G+空質粒組和沉默C3G+過表達人C3G組。轉染質粒72h后，采用RT-PCR法檢測目的基因C3G mRNA的表達，流式細胞術檢測H9C2心肌細胞凋亡情況，MTT比色法測定細胞增殖率，Western blotting檢測細胞C3G、 p-ERK1/2、Bax及Flag的蛋白表達水平。
　　結果：慢病毒感染熒光圖：經(jīng)嘌呤霉素篩選85％以上細胞被綠色熒光蛋白標記，即85%以上細胞被慢病毒感染；與空白對照組和陰性對照組比較，沉默

3、C3G組和空質粒組的細胞中Bax蛋白表達水平和凋亡率均增加（P<0.01，P<0.05），各組細胞C3G mRNA、C3G蛋白、p-ERK1/2蛋白的表達水平和細胞增值率則均降低（P<0.01，P<0.05）；另一方面，過表達人C3G基因組的相應結果則相反。
　　結論：沉默C3G基因能有效抑制細胞的增殖，促進H9C2心肌細胞凋亡；過表達C3G基因能逆轉沉默C3G基因對H9C2心肌細胞的影響，表現(xiàn)為細胞凋亡降低，細胞增殖增加，其機制