人翼狀胬肉Racl、MMP-2及Ki-67的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：翼狀胬肉（pterygium）是一種常見(jiàn)的眼表疾病，表現(xiàn)為呈三角形增厚的球結(jié)膜組織病變。其頭部侵襲生長(zhǎng)入角膜，體部位于瞼裂區(qū)的一側(cè)。組織病理學(xué)改變主要表現(xiàn)：高度纖維血管化及富含彈性纖維變性的結(jié)締組織、角膜上皮基底膜的破壞，纖維組織侵入Bowman層及角膜基質(zhì)淺層。生物學(xué)上表現(xiàn)為具有一些腫瘤樣特性：輕度發(fā)育不良、局部浸潤(rùn)性和高復(fù)發(fā)率等。
　　 Ras相關(guān)的C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum t

2、oxin substrate1， Racl)通過(guò)調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架，促進(jìn)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)。當(dāng)Racl被激活后，可參與肌動(dòng)蛋白應(yīng)力纖維和粘附斑形成，促進(jìn)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)重組，調(diào)節(jié)片狀偽足與絲狀偽足伸延，影響細(xì)胞的形體極化，增強(qiáng)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)遷移。基質(zhì)金屬蛋白酶2（Matrix metalloproteinase-2， MMP-2）是MMps家族成員之一，對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix， ECM)有廣泛的降解作用，是調(diào)節(jié)ECM動(dòng)態(tài)平

3、衡的最重要的酶系之一。MMP-2在翼狀胬肉中參與ECM的破壞及新生血管的形成而備受關(guān)注。Ki-67是一種存在于增殖細(xì)胞核基質(zhì)內(nèi)的抗原，Ki-67增殖指數(shù)可以敏感地反映出細(xì)胞的增殖活性。翼狀胬肉組織存在異常的增殖調(diào)控，使得胬肉的上皮及間質(zhì)細(xì)胞和正常結(jié)膜處于不同的細(xì)胞分裂周期。
　　 本研究首次采用免疫組化法檢測(cè)Racl在翼狀胬肉中的表達(dá)，同時(shí)檢測(cè)MMP-2和Ki-67的表達(dá)，并分析這三者在翼狀胬肉表達(dá)的相關(guān)性，試圖探討利用Racl

4、、MMP-2及Ki-67作為標(biāo)記物評(píng)估翼狀胬肉生物學(xué)特性，為臨床診療提供參考。
　　 方法：
　　 39例原發(fā)性翼狀胬肉組織標(biāo)本取自2009年3月～2009年7月在河北省眼病治療中心行翼狀胬肉切除術(shù)的患者。其中男性21例，女性18例；平均年齡60.5歲；靜止期12例，進(jìn)展期27例。對(duì)照組取正常球結(jié)膜12例，其中男性7例，女性5例；平均年齡41.2歲。所有病例術(shù)前均排除其他角膜及結(jié)膜疾病。所有標(biāo)本術(shù)后立即用10％中性福爾馬

5、林固定，石蠟包埋，切片后分別進(jìn)行HE染色和Racl、MMP-2及Ki-67免疫組化染色。
　　 免疫陽(yáng)性反應(yīng)物呈黃色、棕黃色或棕褐色顆粒狀。表達(dá)類(lèi)型：Racl和MMP-2表達(dá)為細(xì)胞漿型；Ki-67表達(dá)為細(xì)胞核型；每種染色每例均隨機(jī)觀察10個(gè)高倍視野(×400)，根據(jù)鏡下棕色反應(yīng)強(qiáng)度及陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，用半定量積分法判定結(jié)果。
　　 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析處理。等級(jí)相關(guān)資料采用秩和檢驗(yàn)，兩兩指標(biāo)

6、間相關(guān)性采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。以a=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有顯著性。
　　 結(jié)果：
　　 1翼狀胬肉中Racl表達(dá)：
　　 正常球結(jié)膜組織中未見(jiàn)Racl陽(yáng)性表達(dá)，39例翼狀胬肉組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為59％，Racl在翼狀胬肉中的陽(yáng)性表達(dá)明顯高于正常球結(jié)膜組織(P＜0.05)。靜止期Racl陽(yáng)性表達(dá)率為58.3％(7/12)，進(jìn)展期陽(yáng)性表達(dá)率為59.2％(16/27)，靜止期和進(jìn)展期翼狀胬

7、肉的Racl陽(yáng)性表達(dá)率比較無(wú)顯著性差異（尸＞0.05）。不同性別和不同年齡組Racl陽(yáng)性表達(dá)亦無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。
　　 2翼狀胬肉中MMP-2表達(dá)：
　　 正常球結(jié)膜組織中未見(jiàn)MMP-2陽(yáng)性表達(dá)，39例翼狀胬肉組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為51.2％，翼狀胬肉MMP-2的陽(yáng)性表達(dá)明顯高于正常球結(jié)膜組織(P＜0.05）。靜止期MMP-2陽(yáng)性表達(dá)率為50％(6/12)，進(jìn)展期陽(yáng)性表達(dá)率為51.8％(14/27)，靜止期和進(jìn)

8、展期MMP-2陽(yáng)性表達(dá)率比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。不同性別和不同年齡組MMP-2陽(yáng)性表達(dá)亦無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。
　　 3翼狀胬肉中Ki-67表達(dá)：
　　 正常球結(jié)膜組織中Ki-67僅在少量基底細(xì)胞表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)率為25％(3/12)。39例翼狀胬肉組織陽(yáng)性表達(dá)率為64.1％(25/39)，Ki-67在翼狀胬肉中的陽(yáng)性表達(dá)與正常球結(jié)膜組織中的表達(dá)差異有顯著性（尸＜0.05）。Ki-67在12例靜止期翼狀胬

9、肉中陽(yáng)性表達(dá)率為33.3％(4/12)，在27例進(jìn)展期翼狀胬肉中陽(yáng)性表達(dá)率為77.8％(21/27)，靜止期和進(jìn)展期翼狀胬肉的Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異（尸＜0.05）。不同性別之間的表達(dá)差異不明顯，男女陽(yáng)性率分別為61.9％(13/21)和66.7％(12/18)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05）。不同年齡組的表達(dá)無(wú)差異(P＞0.05）。
　　 4翼狀胬肉中Racl、MMP-2和Ki-67表達(dá)的相關(guān)分析

10、>　　 Racl表達(dá)與MMP-2表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.571，P＜0.05）。Racl表達(dá)與Ki-67表達(dá)、MMP-2表達(dá)與Ki-67表達(dá)均無(wú)相關(guān)性(r=0.384，r=0.037，P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1首次發(fā)現(xiàn)翼狀胬肉上皮組織表達(dá)Racl。Racl的高表達(dá)可能在翼狀胬肉的形成和發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起一定作用。
　　 2 Racl、MMP-2及Ki-67在翼狀胬肉中的表達(dá)明顯高于正常球結(jié)膜，提示翼狀