自制α-硫辛酸緩釋片對兔動脈粥樣硬化的影響.pdf

1、隨著經濟社會的發(fā)展，我國心血管疾病的發(fā)病率已經排在各種疾病之首。心血管疾病是現在和將來很長一段時間內人類必須面對的最重大的公共衛(wèi)生問題之一。其中，動脈粥樣硬化及其并發(fā)癥占了相當大一部分。動脈粥樣硬化是以血管內皮細胞（vascular endothelial cell，VEC）完整性破壞，巨噬細胞游移，平滑肌細胞和成纖維細胞增生，以及細胞內外脂質積聚為主的一種病理過程。關于動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）的發(fā)病機制存在

2、多種學說。但AS的具體機制尚未完全闡明。 脂質與冠心病的關系已被證實。大量流行病學資料顯示，動脈粥樣硬化的嚴重程度與血漿膽固醇水平呈正相關，低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）水平升高是動脈粥樣硬化及由動脈粥樣硬化所引起的心腦血管疾病的最重要的危險因素。近年來研究證明，正常的LDL-C不能有效刺激巨噬細胞轉變成泡沫細胞，只有經過修飾，主要是在機體氧化應激狀態(tài)下，

3、被氧化成氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein，Ox-LDL）才能刺激巨噬細胞很快轉變成泡沫細胞，從而有利于動脈粥樣硬化的發(fā)生。氧化應激狀態(tài)下，血管壁內過多生成的活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）能使內皮下間隙的LDL氧化修飾生成Ox-LDL，這是動脈粥樣硬化病理過程中最重要的早期事件。所以氧化應激和氧化低密度脂蛋白在動脈粥樣硬化中發(fā)揮著重要作用，抗氧化治療就成

4、為阻斷動脈粥樣硬化進程的關鍵環(huán)節(jié)。 目前用于臨床的天然抗氧化劑主要有維生素C（Vitamin C，VitC）、維生素E（Vitamin E，VitE）和β-胡蘿卜素。維生素C為水溶性抗氧化劑，不容易與脂質結合從而發(fā)揮抗脂質氧化作用，VitE和β-胡蘿卜素為脂溶性抗氧化劑，其與氧自由基為可逆性結合，抗氧化能力較弱。為此迫切尋找一種更好的抗氧化劑。 Α-硫辛酸（α-Lipoic Acid，LA）是已知天然抗氧劑中效果最強的一

5、種抗氧化劑，是目前已知的唯一既可在水相又可在脂相中溶解的抗氧化劑，大量實驗證明LA具有比VitC和VitE更為強大的抗氧化性。近年來，LA因其強大的抗氧化作用及其在糖尿病和糖尿病并發(fā)癥及缺血再灌注損傷等方面的治療作用倍受國際生物醫(yī)學界的關注。但是，目前有關硫辛酸對動脈粥樣硬化作用的動物實驗報導極少，在國內外罕見。 所以我們采用食餌性兔動脈粥樣硬化模型，以觀察自制硫辛酸緩釋片對動脈粥樣硬化的影響，探討其可能作用途徑，為早期防治動脈

6、粥樣硬化提供理論依據，同時為硫辛酸緩釋片臨床應用提供實驗依據。 目的: 1.觀察硫辛酸對血脂的影響； 2.觀察硫辛酸對機體氧化應激的影響； 3.觀察硫辛酸對Ox-LDL水平的影響； 4.觀察硫辛酸對動脈粥樣硬化的影響； 5.探討硫辛酸對動脈粥樣硬化的干預機制。 對象與方法: 1.研究對象 選擇健康新西蘭大白兔24只，雌雄不拘，體重（2.3-2.7）kg，喂養(yǎng)1周后隨

7、機分成3組，分別為正常組、模型組、硫辛酸組，每組8只。 2.實驗方法 給予普通顆粒飼料喂養(yǎng)1周后，24只兔隨機分為3組，正常組、模型組、硫辛酸組各8只。 ①正常組：喂飼普通顆粒飼料。 ②模型組：用高脂飼料喂養(yǎng)，即在普通飼料中加入1%膽固醇和8%豬油。 ③硫辛酸組：用高脂飼料喂養(yǎng)，另外每只兔通過胃管給予硫辛酸300 mg/d。喂飼高脂飼料及預防性用藥12周，實驗共13周。 清晨空腹耳靜脈采血

8、12 mL，兔血清甘油三脂（triacylglycerol，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL）、低密度脂蛋白膽固醇水平在珠江醫(yī)院檢驗科由全自動生化分析儀完成。兔血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、Ox-LDL、內皮素（end

9、othelium，ET）及一氧化氮（nitric oxide，NO）水平參照檢測試劑盒說明書進行。 3.統(tǒng)計學分析 所有資料均采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。正態(tài)分布資料的描述性統(tǒng)計分析采用均數士標準差（x±s），統(tǒng)計推斷主要采用單因素方差分析，均數的兩兩比較采用LSD-t檢驗；偏態(tài)分布資料轉化為正態(tài)分布資料后進行處理，如無適當的轉化方式則采用非參數檢驗，兩組比較采用Wilcoxon秩和檢驗，多組比較采用Kru

10、skal-Wallis H檢驗。血清MDA、SOD、Ox-LDL、ET及NO水平之間的相關性采用簡單相關分析。探討硫辛酸對Ox-LDL的影響用協(xié)方差分析。本論文所有統(tǒng)計推斷檢驗水準均設為α=0.05。 結果: 2.1實驗動物數量分析納入大白兔24只，分成3組，全部進入結果分析，無脫失。 2.2各組兔血脂水平的比較喂飼高脂飼料后，模型組兔血清中TC、TG、LDL水平均顯著高于正常對照組（P<0.05），HDL水平顯

11、著低于正常對照組（P<0.05）。硫辛酸組兔血清中TC、TG、LDL水平均顯著低于模型組（P<0.05）。HDL水平與模型組比較差異無顯著性意義（P>0.05）。 2.3各組兔血清SOD、NO、MDA、ET-1、Ox-LDL水平的比較。模型組血清SOD和NO水平顯著低于正常對照組（P<0.05），MDA、ET-1及Ox-LDL含量顯著高于正常對照組（P<0.05）；硫辛酸組SOD和NO水平顯著高于模型組（P<0.05），MDA、

12、ET及Ox-LDL水平顯著低于模型組（P<0.05）。 2.4血清Ox-LDL與SOD、NO、MDA、ET-1水平的相關分析 Ox-LDL水平與SOD水平成顯著負相關（r=-0.862，P=0.000）； Ox-LDL水平與MDA水平成顯著正相關（r=0.946，P=0.000）； Ox-LDL水平與NO水平成顯著負相關（r=-0.906，P=0.000）； Ox-LDL水平與ET水平成顯著正相關（r=0.894，P=0.000

13、）。 2.5以LDL、MDA水平作為協(xié)變量，以分組作為因變量，以Ox-LDL為反應變量，做協(xié)方差分析：在剔除了LDL、MDA的影響后，硫辛酸可顯著降低Ox-LDL水平（F=8.564，P=0.002）。 結論: 本課題共入選24例研究對象，采用食餌性兔動脈粥樣硬化模型，探討自制α-硫辛酸緩釋片是否對動脈粥樣硬化具有早期干預作用，得出以下結論： 1、硫辛酸具有降低TC、TG、LDL的作用。 2、硫辛