2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究細粒棘球絳蟲抗原B(EgAgB)8-kDa亞單位基因家族成員(EgAgB8/1、EgAgB8/2、EgAgB8/3、EgAgB8/4、EgAgB8/5)在蟲體發(fā)育各階段(蟲卵、棘球蚴生發(fā)層、原頭蚴及成蟲)基因表達的差異,為包蟲感染中間宿主和終末宿主的免疫學(xué)診斷篩選特異性優(yōu)勢表達抗原。方法:分別從細粒棘球絳蟲成蟲、蟲卵、原頭蚴和棘球蚴生發(fā)層提取總RNA,用AMV First Strand cDNA Synthesis Kit反轉(zhuǎn)

2、錄成cDNA,根據(jù)EgAgB 5個亞單位(EgAgB8/1、EgAgB8/2、EgAgB8/3、EgAgB8/4、EgAgB8/5)序列設(shè)計跨越內(nèi)含子的基因特異性引物;基因表達差異應(yīng)用SYBR Green I熒光實時定量PCR(Real-time PCR)技術(shù)進行定量分析并用內(nèi)參對照基因actin II來標準化定量結(jié)果。結(jié)果:成功建立標準曲線和SYBR Green I熒光實時定量PCR(Real-time PCR)技術(shù)對EgAgB階段性

3、基因表達的定量分析方法;分析顯示,EgAgB8/1和EgAgB8/2在棘球蚴生發(fā)層大量表達(68.874和16.258), EgAgB8/3和EgAgB8/5在成蟲階段有大量表達(1905.512 and 180.315),EgAgB8/4 在成蟲、蟲卵和原頭蚴的表達水平(0.001、0.088和0.102)均較棘球蚴生發(fā)層表達量(3.576)低。結(jié)論:EgAgB 5個亞單位的基因表達在蟲體發(fā)育各個階段顯現(xiàn)出明顯差異:①EgAgB8/1

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