胃癌組織中Ezrin、MMP-9的表達(dá)及與MVD關(guān)系的研究.pdf

1、胃癌是消化系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤,在我國(guó)其死亡率居各種癌癥的首位。由于胃癌早期常無(wú)特異的癥狀,早期發(fā)現(xiàn)較為困難。相對(duì)于消化道其他惡性腫瘤,胃癌易發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移和血道轉(zhuǎn)移,因而預(yù)后極差,5年生存率很低。腫瘤轉(zhuǎn)移是在基因調(diào)控下多因素參與、多階段發(fā)展的復(fù)雜病理過(guò)程?，F(xiàn)有的研究結(jié)果表明,此過(guò)程受腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因及轉(zhuǎn)移抑制基因、血管和淋巴管生成因子、細(xì)胞表面的蛋白多糖、粘附分子、細(xì)胞外基質(zhì)等多種因素的調(diào)控。Ezrin蛋白是一種膜-細(xì)胞骨架連接蛋白,具

2、有維持細(xì)胞形態(tài)和運(yùn)動(dòng),連接黏附分子及調(diào)節(jié)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等功能。通過(guò)對(duì)許多腫瘤組織的研究發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中Ezrin蛋白的表達(dá)水平都顯著高于正常組織,且腫瘤細(xì)胞中常有Ezrin蛋白亞細(xì)胞定位的改變;在一些轉(zhuǎn)移能力較強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞中,Ezrin蛋白常呈過(guò)表達(dá)?，F(xiàn)有的研究認(rèn)為Ezrin蛋白主要通過(guò)影響細(xì)胞粘附、腫瘤細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞凋亡和腫瘤細(xì)胞吞噬進(jìn)而參與到腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的各個(gè)環(huán)節(jié)?；|(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,M

3、MPs)是一類(lèi)鋅離子依賴(lài)性蛋白酶家族,在體內(nèi)其主要作用是降解細(xì)胞外基質(zhì),如間質(zhì)膠原酶、明膠酶、間質(zhì)溶素等,MMP-9是該家族中的重要一員。研究發(fā)現(xiàn)MMP-9活性上調(diào)與惡性腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),可能是因?yàn)槠浔患せ詈蠼到饧?xì)胞外基質(zhì),使腫瘤細(xì)胞脫落,導(dǎo)致腫瘤向周?chē)M織浸潤(rùn)并侵入血管、淋巴管而遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移依賴(lài)于腫瘤血管生成。血管生成是腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的基礎(chǔ),豐富的血管不僅增加了腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血循環(huán)的機(jī)率,而且腫瘤細(xì)胞還可

4、侵入鄰近與毛細(xì)血管伴行的淋巴管,促進(jìn)淋巴道轉(zhuǎn)移。微血管密度(microvessel density,MVD)可以指示腫瘤血管增殖情況,從而判斷腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能。有關(guān)Ezrin蛋白,MMP-9在胃癌中的表達(dá)及其與MVD關(guān)系的研究,迄今國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。為此,本研究采用免疫組化SP法,分別檢測(cè)了52例胃癌、31例癌旁不典型增生組織及21例正常胃黏膜組織中Ezrin蛋白、MMP-9的表達(dá)及MVD,并探討了三者的相互關(guān)系。為進(jìn)一步探討胃癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)

5、移機(jī)制及尋找有效地抑制胃癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移途徑提供理論依據(jù)。
　　方法：1.采用免疫組化SP法檢測(cè)Ezrin蛋白、MMP-9和CD105標(biāo)記的MVD在正常胃黏膜(n=21)、不典型增生胃黏膜(n=31)及胃癌組織(n=52)中的表達(dá)。2.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:所有數(shù)據(jù)均采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,陽(yáng)性率之間的比較采用χ~2檢驗(yàn),兩組資料均數(shù)之間比較用t檢驗(yàn);多組資料之間比較用單因素方差分析;兩分類(lèi)變量之間的關(guān)系分析采用spearm

6、an等級(jí)相關(guān)分析表示,以α=0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：1.正常胃黏膜、癌旁不典型增生和胃癌組織中Ezrin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別為4.8％(1/21),35.5％(11/31),63.5％(33/52);癌組織Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與相應(yīng)的癌旁不典型增生組織及正常胃黏膜組織兩兩相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。2.侵及淺肌層、深肌層和漿膜層的胃癌組織中Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為44.4％(8/18)、52.

7、9％(9/17)和94.1％(16/17),侵及漿膜層的胃癌組織中Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于前兩者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),而侵及深肌層的胃癌組織中Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與淺肌層組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3.32例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組織中Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為81.3％(26/32);而無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移20例胃癌組織中Ezrin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率為35.0％(7/20),兩組間胃癌組織Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)

8、率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。4.正常胃黏膜、癌旁不典型增生和胃癌組織中MMP-9蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為14.30％(3/21)、48.40％(15/31)和75.00％(39/52);癌組織MMP-9蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與相應(yīng)的癌旁不典型增生組織及正常胃黏膜組織兩兩相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.016)。5.侵及淺肌層、深肌層和漿膜層的胃癌組織中MMP-9蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為44.4％(8/18)、58.8％(10/17)和94.1

9、％(16/17)。侵及漿膜層的胃癌組織MMP-9蛋白陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于前兩者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.016),侵及深肌層的胃癌組織中MMP-9蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與淺肌層組相比差異無(wú)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。6.32例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組織中MMP-9蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為81.3％(26/32),而無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移20例胃癌組織中MMP-9蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為40.00％(8/20),兩組間胃癌組織MMP-9陽(yáng)性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0

10、1)。7.正常胃黏膜、癌旁不典型增生和胃癌組織中,CD105標(biāo)記的MVD平均值分別為18.10±8.37、35.77±7.82和43.60±8.73,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。癌組織MVD與相應(yīng)的癌旁非典型增生組織及正常胃黏膜組織兩兩相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。8.侵及淺肌層、深肌層和漿膜層的胃癌組織中,MVD平均值分別為35.89±6.07、43.18±6.91和52.18±3.28;侵及漿膜層的胃癌組織中MV

11、D明顯高于前兩者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。9.32例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中,MVD平均值為48.53±6.01,而無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的20例胃癌組織中,MVD平均值為35.70±6.11,兩組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。10.Ezrin蛋白與MMP-9在胃癌中表達(dá)的相關(guān)性經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示呈顯著正相關(guān)(P<0.001);Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)組的MVD平均值(47.52±7.72)高于陰性表達(dá)組(36.79±5.7

12、4),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);MMP-9蛋白陽(yáng)性表達(dá)組的MVD平均值(47.62±7.35)高于陰性表達(dá)組(36.00±5.51),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。 結(jié)論：1.Ezrin蛋白參與胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程并且與胃癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移有關(guān)。2.MMP-9蛋白參與胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程,MMP-9蛋白與胃癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移有關(guān)。3.胃癌組織中增生的微血管參與胃癌的發(fā)生發(fā)展并且與胃癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移有關(guān)。4.Ezrin蛋白、MMP-9蛋