VEGF與MMP-9在喉癌組織中的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系.pdf

1、喉癌是耳鼻咽喉科最常見的腫瘤之一,同其它腫瘤一樣,其發(fā)生、發(fā)展乃是機(jī)體內(nèi)外多種致癌因素共同作用的結(jié)果,血管生成對于其生長、浸潤及轉(zhuǎn)移亦應(yīng)具有不可忽視的作用.但目前國內(nèi)外這方面的研究報道不多,且意見不一.該實(shí)驗(yàn)通過免疫組化方法檢測42例喉癌組織中VEGF、MMP-9的表達(dá)及腫瘤微血管計數(shù)(microvessel count, MVC),旨在分析VEGF和MMP-9對喉癌血管生成的影響及兩者間可能具有的相關(guān)性,同時探討VEGF和MMP-9與

2、喉癌分化程度及TNM分期等臨床生物學(xué)行為間的關(guān)系,以期為喉癌的預(yù)后及抗血管生成治療研究提供參考.材料與方法42例喉癌組織標(biāo)本均取自浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科1997年2月-2002年6月間收治的喉癌患者.其中,男性39例,女性3例;年齡40-77歲,平均57.6±7.79歲;所有患者術(shù)前均未接受放療和化療,術(shù)后病理診斷均為喉鱗狀細(xì)胞癌;高、中、低分化癌分別為20、17、5例;依1997年UICC腫瘤TNM分類標(biāo)準(zhǔn):Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、

3、Ⅳ期分別為9、11、18、4例.所有組織標(biāo)本均經(jīng)10﹪中性福爾馬林液固定,常規(guī)石蠟包埋,4μm厚連續(xù)功片,采用免疫組化Envision二步法分別行VEGF、MMP-9、CD34染色.顯微鏡下判斷染色結(jié)果,以腫瘤細(xì)胞胞漿內(nèi)呈現(xiàn)棕黃色判定為VEGF陽性腫瘤細(xì)胞.VEGF表達(dá)強(qiáng)度參考Volm Metal的評判標(biāo)準(zhǔn):在400倍鏡下隨機(jī)選取5個視野,分別計算癌巢區(qū)陽性腫瘤細(xì)胞占全部計數(shù)腫瘤細(xì)胞的比率,平均值>25﹪為VEGF陽性.MMP-9染色結(jié)

4、果照此判定.MVC值計數(shù)先在100倍鏡下尋找微血管密集區(qū),然后在200倍鏡下計數(shù)5個不同視野中的微血管數(shù),單個著色的內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞叢均按獨(dú)立的血管分別計數(shù),取其平均值作為1個標(biāo)本的MVC值.所有數(shù)據(jù)均用SPSS10.0 for windows統(tǒng)計軟件包在計算機(jī)上處理分析.統(tǒng)計方法包括x<'2>檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)及Fisher's精確檢驗(yàn).結(jié)論1.VEGF與MMP-9在喉鱗癌中的表達(dá)與腫瘤微血管計數(shù)(MVC)顯著正相關(guān),二者對腫瘤血管生成起