COX-2抑制劑干預對體外培養(yǎng)的EMs間質細胞增殖的影響.pdf

1、目的： （1）觀察COX-2抑制劑對體外培養(yǎng)的內異癥間質細胞增殖的影響。 （2）探討COX-2抑制劑對體外培養(yǎng)的內異癥細胞干預的機制。（3）探討COX-2抑制劑在治療子宮內膜異位癥中的應用價值。 方法： 實驗標本選取12例異位內膜標本取自山東省立醫(yī)院婦產科2006年3月至2007年1月因卵巢型內異癥行手術的患者，均經病理證實為EMs。正常對照組：25例取自同期因各種原因行診斷性刮宮或宮腔鏡檢查后經病理學診斷為

2、正常的增生期或分泌期的子宮內膜標本。無菌收集實驗組患者異位囊腫增厚的部分囊內壁及對照組內膜組織進行，一部分用10％多聚甲醛固定，用于組織學研究，一部分分離間質細胞培養(yǎng)，用于Nimesulide與Celecoxib對異位內膜細胞增殖影響的研究。步驟如下： 1.取10％多聚甲醛中固定的異位內膜及正常內膜組織，脫水、包埋、切片，烤干。石蠟切片行HE染色，并行免疫組化檢測COX-2水平。 2.分離并培養(yǎng)內膜間質細胞，傳代并進入對

3、數(shù)生長期后分別行Celecoxib及Nimesulide干預，MTT法檢測不同濃度及時間下抑制率，繪制細胞生長曲線。 3.EIA法檢測COX-2抑制劑干預后PGE2水平。 4.流氏細胞術檢測COX-2抑制劑干預后凋亡率及細胞周期分布。 結果： 1.免疫組化檢測COX-2水平; 異位內膜組COX-2水平顯著高于對照組（P<0.05）。 2.MTT檢測; 選擇性COX-2抑制劑Cele

4、coxib及Nimesulide均能抑制體外培養(yǎng)的異位內膜間質細胞的增殖，且呈時間濃度劑量依賴關系。 3.PGE2水平檢測; 選擇性COX-2抑制劑Celecoxib及Nimesulide能抑制體外培養(yǎng)的子宮內膜異位癥間質細胞產生的PGE2，且呈時間濃度劑量依賴。 4.凋亡檢測; COX-2抑制劑干預后的細胞其凋亡率明顯增加，與對照組相比有統(tǒng)計學意義，且呈時間濃度劑量依賴關系。 5.細胞周期檢測

5、; 流氏細胞術檢測結果顯示，COX-2干預后的細胞，其位于G0/G1期比率明顯增加，與對照組相比有統(tǒng)計學意義，且呈時間濃度劑量依賴。 結論: 1.COX-2在內異癥發(fā)生及發(fā)展中起重要作用 2.COX-2抑制劑可以明顯抑制體外培養(yǎng)的內異癥間質細胞，并呈時間濃度計量依賴性 3.COX-2抑制劑通過COX-2依賴及非COX-2依賴途徑抑制間質細胞的增殖： （1）COX-2抑制劑通過抑制COX-2的