肺癌和前列腺癌骨轉(zhuǎn)移血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、第一部分肺癌骨轉(zhuǎn)移血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究 目的：應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)雙向熒光差異凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)尋找并鑒定肺癌骨轉(zhuǎn)移患者與對(duì)照組肺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者血清之間的差異表達(dá)蛋白，探討肺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清中可能與肺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)生、發(fā)展相關(guān)的蛋白質(zhì),以期尋找肺癌骨轉(zhuǎn)移血清標(biāo)志物。 方法：收集男性肺癌伴骨轉(zhuǎn)移、不伴骨轉(zhuǎn)移各12例，女性肺癌伴骨轉(zhuǎn)移、不伴骨轉(zhuǎn)移各12例血清樣本。同組血清等量混合，用除白蛋白試劑盒除去血清中的白蛋白，再經(jīng)除鹽濃縮后，將4

2、組處理后的血清樣品用不同的CyDye染料交叉標(biāo)記后進(jìn)行雙向熒光差異凝膠電泳（2-D DIGE）。利用DeCyder軟件分析，將肺癌伴骨轉(zhuǎn)移與肺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移比較的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)行基質(zhì)輔助激光解析離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）鑒定。 結(jié)果：雙向熒光差異凝膠電泳顯示,肺癌骨轉(zhuǎn)移組血清蛋白中有16個(gè)斑點(diǎn)與肺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移組有顯著差異。肺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清中11個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)水平顯著增加，5個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)水平顯著下降。5個(gè)差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行

3、膠內(nèi)原位酶解、肽質(zhì)指紋圖譜分析，成功得到了個(gè)4蛋白質(zhì)肽質(zhì)指紋圖,并查詢數(shù)據(jù)庫(kù)初步鑒定了該4個(gè)蛋白質(zhì)分別為RBP－TTR、結(jié)合珠蛋白（Hp）、S-亞硝基血紅蛋白(SNO- Hb)、desArg141 alpha Hb。 結(jié)論：雙向熒光差異凝膠電泳結(jié)合質(zhì)譜鑒定是血清差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究的可靠平臺(tái)和有力工具。所鑒定出的蛋白質(zhì)可能與肺癌骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生、發(fā)展有關(guān),有助于肺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)病機(jī)理的了解。 第二部分前列腺癌骨轉(zhuǎn)移血清蛋白質(zhì)組學(xué)研

4、究 目的：應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)雙向凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)尋找并鑒定前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者與對(duì)照組前列腺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者血清之間的差異表達(dá)蛋白，探討前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清中可能與前列腺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)生、發(fā)展相關(guān)的蛋白質(zhì),以期尋找前列腺癌骨轉(zhuǎn)移血清標(biāo)志物。 方法：收集前列腺癌伴骨轉(zhuǎn)移、不伴骨轉(zhuǎn)移各5例血清樣本。血清樣品用除白蛋白試劑盒除去血清中的白蛋白后進(jìn)行雙向凝膠電泳，ImageMaster 2D Platinum軟件分析，有意義的差異蛋白質(zhì)

5、點(diǎn)行基質(zhì)輔助激光解析離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）鑒定。 結(jié)果：雙向凝膠電泳顯示，前列腺癌骨轉(zhuǎn)移組血清蛋白中有15個(gè)斑點(diǎn)與前列腺癌無(wú)骨轉(zhuǎn)移組有顯著差異。前列腺癌骨轉(zhuǎn)移患者血清中10個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)水平顯著增加，5個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)水平顯著下降。5個(gè)差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行膠內(nèi)原位酶解,肽質(zhì)量指紋圖譜分析成功得到了3個(gè)蛋白質(zhì)肽質(zhì)量指紋圖譜,并查詢數(shù)據(jù)庫(kù)初步鑒定了該3個(gè)蛋白質(zhì)分別為鋅a2糖蛋白、結(jié)合珠蛋白和載脂蛋白CⅢ。 結(jié)論：