圍產期奶牛血清蛋白質組學的初步研究.pdf

1、本研究目的是對圍產期奶牛血清中蛋白質組的變化進行初步探索，共包括以下三部分：
　　 第一部分：通過ELISA方法對圍產期奶牛血清中免疫蛋白的變化進行研究。采集36頭中國荷斯坦奶牛，分為臨床健康奶牛組(n=26)和高體細胞數(shù)奶牛組(n=10)。利用酶聯(lián)免疫吸附試驗，檢測圍產期奶牛血清中免疫球蛋白、轉鐵蛋白和白蛋白的變化規(guī)律。試驗結果表明：臨床健康奶牛血清中IgM濃度在分娩前后無顯著變化，高體細胞數(shù)奶牛血清中IgM濃度顯著高于臨床健

2、康奶牛(P=0.03)；臨床健康奶牛血清中IgG濃度在分娩后升高，高體細胞數(shù)奶牛血清中IgG濃度與臨床健康奶牛無顯著差異；臨床健康奶牛血清中IgA濃度在分娩前后無顯著變化，分娩后第7天和第21天，高體細胞數(shù)奶牛IgA濃度顯著高于臨床健康奶牛(P=0.03；P=0.04)；臨床健康奶牛血清中轉鐵蛋白濃度臨近分娩呈升高趨勢，分娩后降低，高體細胞數(shù)奶牛血清中轉鐵蛋白濃度與臨床健康奶牛無顯著差異；臨床健康奶牛血清中白蛋白濃度在分娩前后無顯著變化

3、，高體細胞數(shù)奶牛分娩前白蛋白濃度高于分娩后。奶牛臨近分娩和分娩后血清中免疫球蛋白、轉鐵蛋白和白蛋白的變化與圍產期免疫功能下降有關。
　　 第二部分：采用肽文庫試劑盒ProteoMiner富集荷斯坦奶牛的血清，運用二維凝膠電泳結合液相色譜串聯(lián)質譜方法，分析富集前后血清蛋白的變化。結果表明，牛血清經ProteoMiner試劑盒富集，白蛋白含量顯著下調(血清的差異顯著水平P=0.01)，載脂蛋白E顯著增加(血清的差異顯著水平為P=0.

4、01)。該法在降低牛血清中高豐度蛋白的同時有效富集了低豐度蛋白，有利于血清中低豐度蛋白質組的研究。
　　 第三部分：通過定量蛋白質組學方法對圍產期奶牛血清中蛋白質含量的變化進行研究。采集8頭中國荷斯坦奶牛，分別采集產前21d、產后1d的血清樣品，經ProteoMiner試劑盒富集后的血清蛋白采用同位素相對標記與絕對定量技術標記，串聯(lián)質譜鑒定。試驗結果表明：共鑒定78個血清蛋白，其中，結合珠蛋白、脂多糖結合蛋白等19個蛋白在分娩后