Ep-CAM和4D10在胃腸腫瘤血清中的表達及臨床意義.pdf

1、背景：胃癌和結(jié)直腸癌是我國常見的消化道惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率均居前列，而且隨著人們生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的改變，其發(fā)病率和死亡率有上升趨勢。大量臨床資料表明胃癌和結(jié)直腸癌的預(yù)后有賴于早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷以及選擇合理的治療方案。目前治療胃癌和結(jié)直腸癌的主要手段是手術(shù)完整切除腫瘤，并輔以化療、放療、生物免疫及中醫(yī)中藥等綜合治療措施。因此早期診斷、早期治療是降低死亡率、延長患者生存期的關(guān)鍵。 Ep-CAM(Epithelial C

2、ell Adhesion Molecule)也稱為KSA、KS1/4及17-1A等，是近年來發(fā)現(xiàn)的一種嗜同種非鈣離子依賴性上皮細胞粘附分子。Ep-CAM在多種上皮源性癌細胞表面表達，包括胃癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌、頭頸部癌以及肝癌等。Ep-CAM的表達與腫瘤細胞的增殖、去分化、侵襲及轉(zhuǎn)移相關(guān)。我們的前期研究結(jié)果表明，利用組織芯片技術(shù)，研究Ep-CAM在胃癌和結(jié)直腸癌組織以及癌旁組織中的表達情況，結(jié)果顯示Ep-CAM在癌組織中的表達水平明顯高

3、于癌旁組織。 單克隆抗體4D10是以人結(jié)腸癌細胞株LOVO免疫Balb/c小鼠獲得，免疫組化研究顯示，4D10mAb能夠與不同分期的結(jié)腸癌組織切片反應(yīng)，并利用該單抗進行免疫親和層析，可以從培養(yǎng)的結(jié)腸癌細胞株LOVO中純化結(jié)腸癌相關(guān)抗原。從免疫組化的照片中可以發(fā)現(xiàn)，該抗原主要分布于胞膜和胞漿。純化后的抗原進行SDS-PAGE和Western blot分析，結(jié)果顯示其相對分子量約為65KDa。 目的：1.檢測Ep-CAM

4、和4D10在胃癌和結(jié)直腸癌血清中的表達水平；2.并與胃腸道良性疾病(包括結(jié)腸/直腸息肉、潰瘍性結(jié)腸炎、胃炎等)及健康正常人血清表達水平之間進行比較；3.探討胃癌和結(jié)直腸癌血清Ep-CAM和4D10表達水平與腫瘤臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性及臨床意義；4.初步研究Ep-CAM和4D10表達水平之間的相關(guān)性以及兩者用于聯(lián)合診斷的價值。旨在探討其作為胃癌和結(jié)直腸癌腫瘤標(biāo)志物的可行性，以期能夠為胃腸腫瘤的早期診斷提供幫助。 方法：選取我院2

5、005年9月至2006年6月手術(shù)切除并經(jīng)病理證實的原發(fā)性胃癌患者血清標(biāo)本53例和結(jié)直腸癌患者血清標(biāo)本40例為實驗組，同時選取胃腸道良性疾病患者血清標(biāo)本30例和健康正常成人血清標(biāo)本50例(安徽省紅十字會中心血站提供)為對照組。利用雙抗體夾心法ELISA分別檢測實驗組和對照組Ep-CAM和4D10的表達水平；實驗組Ep-CAM和4D10表達水平與患者臨床病理資料之間的關(guān)系；Ep-CAM和4D10表達水平之間的相關(guān)性。實驗結(jié)果以光密度(Opt

6、icalDensity，OD值)表示。 結(jié)果：1.胃癌組Ep-CAM OD平均值為0.550±0.1109，陽性率66％(35/53)；結(jié)直腸癌組血清Ep-CAM OD平均值為0.643±0.0573，陽性率67.5％(27/40)；胃腸道良性疾病組血清Ep-CAM OD平均值為0.248±0.0411，陽性率13.3％(4/30)；健康正常成人組血清Ep-CAM OD平均值為0.247±0.0152，均為陰性。實驗組顯著高于對

7、照組(P<0.01)。 2.胃癌組4D10 OD平均值為0.558±0.1197，陽性率54.7％(29/53)；結(jié)直腸癌組血清4D10 OD平均值為0.741±0.1201，陽性率52.5％(21/40)；胃腸道良性疾病組血清4D10OD平均值為0.331±0.0151，陽性率23.3％(7/30)；健康正常成人組血清4D10 OD平均值為0.262±0.0123，均為陰性。實驗組顯著高于對照組(P<0.01)。

8、3.實驗組Ep-CAM和4D10在胃癌TNM Ⅰ、Ⅱ期和結(jié)直腸癌Dukes A、B期；腫瘤直徑小于5cm以及腫瘤侵及肌層時即有表達，并高于對照組。表明Ep-CAM和4D10在胃癌和結(jié)直腸癌早期即有高水平表達并可以在血清中被檢測到。 4.Ep-CAM和4D10在胃腸腫瘤血清中的表達有相關(guān)性，在所有胃腸腫瘤標(biāo)本中Ep-CAM單項陽性率為66.7％(62/93)，4D10單項陽性率為53.8％(50/93)，兩者聯(lián)合檢測陽性率79.

9、6％(74/93)，聯(lián)合檢測可以提高陽性率。 5.Ep-CAM和4D10在胃腸腫瘤血清中的表達不受患者的年齡、性別、腫瘤的病理類型、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等諸臨床病理參數(shù)的影響。 結(jié)論：1.Ep-CAM和4D10在胃癌和結(jié)直腸癌血清中可以被檢測到，而且表達水平高于對照組，可能由腫瘤細胞產(chǎn)生并參與了胃癌和結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展過程。 　 2.胃癌和結(jié)直腸癌早期即有Ep-CAM和4D10產(chǎn)生，并可以在血清中被檢測到，表達水平