內(nèi)毒素誘導性葡萄膜炎眼中iNOS和精氨酸循環(huán)相關酶的表達.pdf

1、目的：探討誘導性一氧化氮合酶(iNOS)以及精氨酸循環(huán)相關酶在內(nèi)毒素誘導性葡萄膜炎(endotoxin induced uveitis，EIU)眼組織中表達。 方法：35只SPF級Wistar大鼠隨機分成7組，實驗組雙后足底注射200μl的傷寒桿菌內(nèi)毒素(Salmonella yphimurium Lipoplysaccharide，LPS)，對照組注射等量無菌生理鹽水。大鼠分別在LPS注射后0、3、6、12、24、和48h腹腔

2、注射水合氯醛過量致死，一側(cè)眼球在手術顯微鏡下用微量取樣器行前房穿刺收集房水，檢測房水中蛋白濃度、炎細胞計數(shù)和NO含量。然后剜出眼球采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應 (semi-quantitative reverse transcriptiorr-polymerase chainreaction，RT-PCR)檢測iNOS、精氨酸代琥珀酸合成酶(argininosuccinatesynthetase，AS)、精氨酸代琥珀酸裂解酶(argin

3、inosuccinate lyase，AL)mRNA在各組大鼠眼組織中的表達。對側(cè)眼球保持完整，采用免疫組織化學染色方法檢測iNOS和AS在眼組織中的表達及分布。 結(jié)果：RT-PCR結(jié)果顯示，iNOS mRNA表達量在LPS注射后3h開始上升，12h達到最高，之后逐漸下降；AS mRNA的變化較iNOS mRNA略遲2~3h，6h明顯升高，12h時誘導表達量最高(是刺激前的3.5倍)；AL nLRNA在LPS注射前后變化較小(無