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1、目的:分析中藥益智健腦顆粒(YiZhiJianNaoKeLi)干預(yù)SAMP8小鼠海馬的差異蛋白質(zhì)表達(dá),探討益智健腦顆粒治療阿爾茨海默病(AD)的部分作用機(jī)理。 方法:30只6月齡雄性SAMP8小鼠隨機(jī)分為三組,即治療組、對(duì)照組和模型組,每組小鼠各10只。模型組小鼠分組后立即處死,提取海馬并用液氮保存。治療組以益智健腦顆粒濃縮液灌胃,對(duì)照組以等劑量雙蒸水灌胃,共治療8周。療程結(jié)束后,分別處死治療組和對(duì)照組小鼠,提取所需的海馬。再統(tǒng)
2、一提取三組的海馬總蛋白,應(yīng)用雙向凝膠電泳技術(shù)(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)建立了重復(fù)性和分辨率均較好的海馬總蛋白質(zhì)的雙向凝膠電泳圖譜。PDQuest7.2軟件對(duì)三組小鼠海馬蛋白質(zhì)的雙向電泳圖譜進(jìn)行了比較而獲得差異表達(dá)的蛋白質(zhì),采用.MALDI-TOF-MS對(duì)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)進(jìn)行分析,獲取MAIDI-TOF-MS肽質(zhì)量指紋圖譜(PMF),數(shù)據(jù)庫(kù)搜索鑒定差異表達(dá)的蛋白質(zhì)。 結(jié)果:
3、建立了SAMP8小鼠海馬蛋白質(zhì)的雙向凝膠電泳圖譜,采用質(zhì)譜分析結(jié)合數(shù)據(jù)庫(kù)搜索共鑒定出治療組13個(gè)差異表達(dá)大于2倍的蛋白質(zhì),其中有8個(gè)上調(diào),5個(gè)下調(diào)。這些蛋白質(zhì)按功能主要可以分為以下幾類:代謝相關(guān)酶類,細(xì)胞結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白質(zhì),信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)蛋白質(zhì)以及激素類。 結(jié)論:1.益智健腦顆粒可調(diào)節(jié)SAMP8小鼠海馬組織的多種蛋白質(zhì)表達(dá),提示該藥具有多靶點(diǎn)治療的作用。 2.初步建立了SAMP8小鼠海馬蛋白質(zhì)的雙向凝膠電泳圖譜。 3.
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