肝疏泄太過深層機制探索——經(jīng)前期綜合征肝氣逆證獼猴中樞消減cDNA文庫構(gòu)建.pdf

1、山東中醫(yī)藥大學碩士學位論文肝疏泄太過深層機制探索——經(jīng)前期綜合征肝氣逆證獼猴中樞消減cDNA文庫構(gòu)建姓名：于艷紅申請學位級別：碩士專業(yè)：中醫(yī)基礎(chǔ)理論指導教師：喬明琦20050420E x p l o r a t i o no f D e e p M e c h a n i s m o f S t h e n i c D i s p e r s e o f L i v e r - q i————C o n s t r u c t i o

2、no f S u b t r a e t i v e e D N A L i b r a r yo f M a c a q u e B r a i nT i s s u eo fl i v e r - q is t h e n i c s y m p t o m c o m p l e x o f P r e m e n s t r u a l S y n d r o m eS p e c i a l t y ：B a s i cT h

3、 e o r y o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n eA u t h o r ：Y u Y a n h o n gA d v i s o r ：P r o f ．Q i a oM i n g q iA b s 仃a c to b j e c t i v e ：S c r e e nt h e d i f f e r e n t i a l e x p r e s

4、s e d g e n e so fl i v e r - q i s t h e n i cs y m p t o mo fc o m p l e x p r e m e n s t r u a ls y d r o m e ( P M S ) i n m a c a q u e b r a i na n d c o n s t r u c t f o r w a r d a n d r e v e r s es u b t r a

5、c t i v ee D N A l i b r a r y ，i no r d e r t of o r m a g o o d p l a t f o r m f o rs y s t e m i c s t u d y o f t h e c h a n g eo f g e n e t i ce x p r e s s i o na n d r e g u l a t i o nm e c h a n i s m ，p r o

6、v i d eas o l i df o u n d a t i o nf o rl i v e r - q is t h e n i c s y m p t o mc o m p l e x o fT r a d i t i o n a l C h i n e s eM e d i c i n e r e l a t e d d e e pm e c h a n i s m ．M e t h o d s ：M a c a q u e

7、m o d e l o f l i v e r - q is t h e n i cs y m p t o m c o m p l e x o f P M S i so b j e c t ，a p p l y t h et e c h n i q u eo fS M A R T t o g e tt h et h et o t a l f u l l —l e n g t he D N A f r o mt h eb r a i no

8、 f m a c a q u em o d e l ．A p p l yt h et e c h n i q u e o fS S H i n p o s i t i v e a n dn e g a t i v e d i r e c t i o n s t o a c q u i r et h ed i f f e r e n t i a l e x p r e s s e d g e n e s ．A p p l y t h e

9、t e c h n i q u e o f v e c t o r r e c o m b i n e t o a c q u i r er e c o m b i n a n t p l a s m i d s ．A p p l y b l u e ／w h i t e s p o t t e s t t o s c r e e n t h e p o s i t v e c l o n e s a n di d e n t i f

10、y t h ep o s i t v ec l o n e s t h r o u g h e n z y m e d i g e s t i n g ，t h e nt h ep o s i t v eC l o n e sa r es e q u e n c e d ．R e s u l t s ：O b t a i n1 9 2 p o s i t i v ec l o n e si nf o r w a r de D N A s

11、 u b t r a c f i v el i b r a r ya n d1 7 5p o s i t i v ec l o n e si nr e v e r s ee D N A s u b t r a e t i v el i b r a r y ．T h ef r a g m e n t so f d i f f e r e n t i a le x p r e s s e dg e n e sa r ei n s e a e

12、 di n t op l a m i d si n 1 7 8a n d1 2 4c l o n e s ．C o n c l u s i o n ：F o r t h ef i r s tt i m e ，a p p l yt h et e c h n i q u e o fs u p p r e s s i o n s u b t r a c t i v e h y b r i d i z a t i o n t o s t u d

13、 y z a n g x i a n g o fT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c i n e ．P r o b e i n t o t h e p a r t i a l d e e pm e c h a n i s mo fl i v e r - q i s t h e n i cs y m p t o mc o m p l e x ．T h ef o r w a r da n d

14、 r e v e r s es u b t r a c t i v ee D N A l j h a r i e so f m a c a q u e b r a i nt i s s u e so fl i v e r - q is t h e n i cs y m p t o m c o m p l e xo f P M S a r ec o n s t r u c t e d s u c c e s s f u l l y , t

15、 h e s el i b r a r i e sm a yp r o v i d eas o l i df o u n d a t i o nf o rs c r e e n i n ga n dc l o n i n gd i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e dg e n eo f t h i ss y n d r o m e ．K e y w o r d s P r e m e n s

16、 t r u a lS y n d r o m e ；L i v e r - q iS t h e n i cS y m p t o m C o m p l e x ；M a c a q u eM o d e l o f C o m b i n e D i s e a s e a n d S y m p t o m C o m p l e x ；S u b t r a c t i v e e D N AL i b r a r y ；S