經(jīng)前期綜合征肝氣逆、郁兩證動物模型改進及肝失疏泄微觀機制初探.pdf

1、目的：針對前期工作中大鼠個體差異對造模結果干擾及模型宏觀評價半定量打分法不夠客觀缺點，采用曠場法篩選得分相近大鼠進入實驗減小誤差并以該法評價模型大鼠宏觀表現(xiàn)，為情志病證動物模型宏觀評價提供客觀有效方法；針對前期工作中獼猴層級模式判別不夠精確及模型評價量表考核指標不夠理想難題，引入獼猴社會層級模式判別標準化方案規(guī)范前期研究并疊加社會應激因素，按照量表制作規(guī)范流程改進《雌性實驗獼猴情緒評價量表》；以所研制量表為工具進一步開展雌性實驗獼猴表情

2、行為與體內(nèi)相關神經(jīng)介質、性激素及其調(diào)節(jié)激素水平變化相因性研究，為揭示肝疏泄失?，F(xiàn)代機理，提供實驗資料與科學解釋。 方法：應用行為學判定結合改良陰道涂片法確定大鼠動情周期，采用晝夜顛倒配合曠場法篩選行為學得分相近大鼠進入實驗減小誤差，調(diào)整造模刺激強度及持續(xù)時間，應用晝夜顛倒配合曠場法對模型大鼠宏觀表現(xiàn)予以量化評價；采用30分鐘成組隨意觀測及獼猴社會層級模式判別標準化方案規(guī)范獼猴實驗方法并疊加社會應激因素，按照量表制作規(guī)范流程并運用

3、視覺可視化標尺技術改進《雌性實驗獼猴情緒評價量表》開展獼猴模型宏觀表現(xiàn)量化評價。 結果：曠場實驗中，相較正常對照組大鼠造模后逆模組水平得分、垂直得分及曠場實驗總分均顯著增加(P<0.05)，而郁模組大鼠則顯著減少(P<0.05)，用藥后這一趨勢得到明顯糾正(P<0.05)。大鼠模型微觀指標檢測方面，肝氣逆證模型大鼠不同腦區(qū)NE、DA、5-HT含量均有上升趨勢；肝氣郁證模型大鼠不同腦區(qū)DA含量呈下降趨勢，5-HT含量顯著上升。外周

4、單胺類神經(jīng)介質變化趨勢多與中樞相反。肝氣逆證模型大鼠癥狀呈現(xiàn)期血清E<,2>和P含量均呈下降趨勢，肝氣郁證模型大鼠血清E<,2>和P含量亦較正常對照組明顯降低。中樞內(nèi)激素變化與血清中相反。修訂后量表主要考核指標較前大幅改善。憤怒、抑郁、快樂、恐懼因子重測信度系數(shù)分別為：0.90、0.92、0.95、0.92；分半信度為：0.96、0.79、0.87、0.97；效標關聯(lián)效度系數(shù)為：0.93、0.74、0.61、0.68，P值均小于0.05

5、；憤怒、抑郁、快樂、恐懼因子全國常模分別為：21.35±5.13、17.96±4.88、12.68±2.26和21.25±4.47。應用量表研究獼猴模型宏觀表情行為與體內(nèi)微觀指標變化相因性發(fā)現(xiàn)：肝氣逆證獼猴模型5-HT含量與憤怒情緒呈非典型負相關，隨5-HT含量增加，憤怒情緒積分呈下降趨勢，但當5-HT含量上升到一定程度時，憤怒情緒積分反而上升。P含量增加，憤怒情緒積分呈下降趨勢，前期下降較快，后期下降較慢。 結論：大鼠、獼猴模

6、型均較好模擬了PMS病證臨床表現(xiàn)及病理變化，造模方法成熟可靠，具有較好可信度及可重復性；應用曠場法可明確鑒別肝氣逆、郁兩證大鼠模型，為證候動物模型中醫(yī)辨證提供直接依據(jù)；改進后《雌性實驗獼猴情緒評價量表》考核指標結果良好，達到應用要求，使用該量表可明確判別肝氣逆、郁兩證獼猴模型。分析動物模型整體表現(xiàn)與相應微觀指標變化，兩者密切相關，表明中醫(yī)“肝疏泄失常”部分微觀機制：肝疏泄太過所致煩躁易怒等表現(xiàn)可能與下丘腦、邊緣葉NE、DA、5-HT水平