煙草病毒的檢測和防治新技術(shù)研究.pdf

1、 煙草病毒病是全世界煙草栽培區(qū)發(fā)生普遍，危害嚴(yán)重的一大類病害。圍繞著煙草病害的防治，本研究進(jìn)行了兩方面的探索。其一，分離、提純馬鈴薯Y病毒(PVY)、黃瓜花葉病毒(CMV)、煙草普通花葉病毒(TMV)、煙草蝕紋病毒(TEV)、馬鈴薯X病毒(PVX)、煙草環(huán)斑病毒(TRSV)，克隆了6種病毒的外殼蛋白(CP)基因，并進(jìn)行了序列分析，首次明確了PVY、PVX和CMV山東分離物在分類學(xué)上的歸屬地位。制備了不同病毒的抗體和酶標(biāo)抗體，建立了

2、以點(diǎn)免疫結(jié)合技術(shù)(DIBA)為基礎(chǔ)的快速、多元的病毒檢測體系，對山東煙草病毒病進(jìn)行了初步調(diào)查，明確了主要病毒種類。其二，RNA介導(dǎo)的病毒抗性策略應(yīng)用于煙草病毒病防治的研究。在已獲得不同抗病類型的轉(zhuǎn)非翻譯PVY-CP基因煙草的基礎(chǔ)上，研究了RNA介導(dǎo)的病毒抗性遺傳及外源基因的整合方式與RNA介導(dǎo)的病毒抗性產(chǎn)生的關(guān)系，明確了RNA介導(dǎo)的病毒抗性可穩(wěn)定地遺傳；揭示了轉(zhuǎn)基因的結(jié)構(gòu)對于誘發(fā)病毒抗性產(chǎn)生可能起關(guān)鍵的作用，并進(jìn)而設(shè)計(jì)了發(fā)夾結(jié)構(gòu)DNA進(jìn)