Smad3對(duì)牙本質(zhì)涎磷蛋白基因表達(dá)調(diào)控的研究.pdf

1、 本課題利用已建系的成牙本質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞MDPC-23，構(gòu)建DSPP基因啟動(dòng)子螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因載體，分析Smads信號(hào)分子對(duì)DSPP的調(diào)控作用，并利用凝膠電泳遷移率變動(dòng)分析等方法，研究Smad3與DSPP基因的可能結(jié)合位點(diǎn)。結(jié)果表明：pGL3LUC-Pdspp-410～176bp和pGL3LUC-Pdspp-410～+54bp都有較強(qiáng)的啟動(dòng)活性，而pGL3LUC-Pdspp-195～+54bp雖然帶有基本啟動(dòng)子，但是它的啟動(dòng)活

2、性極弱，表明在這一區(qū)域中，存在轉(zhuǎn)錄抑制因子。TGF-β1對(duì)pGL3LUC-Pdspp-410～-176bp和pGL3LUC-Pdspp-410～+54bp活性具有下調(diào)作用，說(shuō)明在410～176bp之間，存在TGF-β1信號(hào)分子的作用位點(diǎn)，發(fā)揮TGF-β1的調(diào)控作用。在MDPC-23細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染入帶有綠色熒光蛋白的Smad3質(zhì)粒后，主要表達(dá)于細(xì)胞胞漿中；在TGF-β1的作用下，綠色熒光的位置發(fā)生轉(zhuǎn)移，由胞漿轉(zhuǎn)移至胞核內(nèi)，證實(shí)Smad3是TG