版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的:課題組前期實驗發(fā)現(xiàn)骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(BMP9)在誘導小鼠永生化根尖牙乳頭干細胞(iSCAP)向成骨/成牙本質方向分化方面能力較強,但目前對于相關分子學機制的研究較少。研究發(fā)現(xiàn),Smad信號通路屬于BMP信號傳導系統(tǒng)中的經(jīng)典通路。因此,本課題主要是研究BMP9是否能夠激活iSCAP細胞中的Smad信號通路,以及Smad信號通路在BMP9誘導iSCAP細胞成骨/成牙本質向分化中的作用。
方法:首先,用Ad-BMP9轉染iSC
2、AP,36h后采用Western免疫印跡實驗檢測Smad1/5/8蛋白的磷酸化水平。隨后,用顯性負性突變受體 ALK1(dnALK1)重組腺病毒和 BMP9條件培養(yǎng)基共同作用于iSCAP,通過Western免疫印跡實驗檢測Smad1/5/8蛋白磷酸化水平;然后,分別采用堿性磷酸酶(ALP)活性檢測和染色方法分析 iSCAP早期成骨/成牙本質指標變化,Western印跡實驗檢測中晚期成骨/成牙本質相關蛋白OCN、OPN表達,茜素紅染色法檢
3、測鈣鹽沉積程度;最后,通過實時熒光定量 PCR(RT-PCR)檢測dnALK1對BMP9誘導iSCAP成骨/成牙本質相關基因Runx2、OCN、OPN和DMP1表達的影響。
結果:BMP9可上調iSCAP中Smad1/5/8的磷酸化水平;dnALK1競爭性抑制BMP9條件培養(yǎng)基的作用后,Smad1/5/8的磷酸化水平下調,BMP9誘導的iSCAP細胞中早期成骨/成牙本質標志物堿性磷酸酶活性下降,中晚期成骨/成牙本質相關蛋白 O
4、CN、OPN表達減少,晚期成骨/成牙本質標志鈣鹽結節(jié)減少。RT-PCR結果顯示重要成骨轉錄因子Runx2基因表達減少,成骨/成牙本質相關基因OCN、OPN、DMP1的表達也受到了抑制。
結論:Smad信號通路在BMP9誘導iSCAP成骨/成牙本質過程中存在并起著重要作用。ALK1是BMP9-Smad信號通路中的重要受體, dnALK1能有效拮抗 BMP9蛋白的活性,但是否同樣抑制其他信號通路還需要進一步研究,后續(xù)我們將通過體內
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- BMP9通過ERK5信號通路調控根尖牙乳頭干細胞成骨-成牙本質分化.pdf
- VEGF-a增強BMP9介導MSCs成骨分化及機制的研究.pdf
- BMP9介導的骨形成及其機制研究.pdf
- BMP9調控小鼠根尖牙乳頭干細胞成牙本質分化及其機制的初不研究.pdf
- BMP9需通過調控Notch信號通路誘導間充質干細胞成骨分化及其作用機制研究.pdf
- Sonic hedgehog信號調控BMP9誘導的間充質干細胞成骨分化.pdf
- 沉默PPARγ2對BMP9介導的C2C12細胞成骨分化的影響.pdf
- 生長激素在BMP9介導的間充質干細胞向成骨分化中的作用.pdf
- EGF與BMP9信號通路交聯(lián)調節(jié)間充質干細胞的成骨分化.pdf
- BMP9通過Erk5信號通路調控間充質干細胞成骨分化.pdf
- BMP-Smad信號通路的調節(jié)及其在成骨分化中的作用.pdf
- BMP9通過MAPKs通路調控間充質干細胞成骨分化及其機制的初步研究.pdf
- MAPKs信號通路在LPS調控的人根尖乳頭細胞成牙本質-成骨向分化過程中的作用.pdf
- JNK激酶途徑調控BMP9誘導的間充質干細胞成骨分化.pdf
- DLL1在BMP9誘導MSCs成骨分化的作用及機制研究.pdf
- SDF-1-CXCR4信號軸在BMP9介導間充質干細胞成骨分化過程中的作用研究.pdf
- Smad串話JNK信號通路在BMP-9誘導PDLSCs成骨分化過程中作用與機制研究.pdf
- Wnt-β-Catenin協(xié)同BMP9信號通路誘導根尖牙乳頭干細胞成骨分化的相關研究.pdf
- miR-23b調控BMP9誘導間充質干細胞成骨分化的機制研究.pdf
- ATRA調控BMP9誘導3T3-L1前脂肪細胞成骨和成脂分化的作用及機制研究.pdf
評論
0/150
提交評論