DFP對染鋁小鼠肝、腎保護作用的機理研究.pdf

1、[目的]： 鋁是環(huán)境中含量最豐富的元素之一，鋁和鋁鹽廣泛應用于食品添加劑、混凝劑、藥物、各種容器和炊具等，因而在日常生活中人們接觸鋁十分頻繁。國內外學者對鋁毒性展開深入研究后認為鋁的毒性不容忽視：飲食中鋁含量增加會增加血清和組織鋁含量，肝鋁含量在最高者之列；鋁經(jīng)腎排泄，也會造成鋁在腎中蓄積，而鋁在肝、腎蓄積會造成對肝、腎的損傷。目前臨床上傾向于用金屬螯合劑來減輕鋁負荷。研究表明鐵螯合劑DFP（1，2—二甲基—3—羥基—4—吡啶酮

2、）排鋁效果較好，但未應用于臨床排鋁。本研究灌胃給予鋁中毒模型小鼠不同濃度的DFP1周，探討短期服用DFP對小鼠肝、腎保護作用的機理，為尋求一種安全有效的排鋁藥物提供依據(jù)。 [方法]： 1 DFP對染鋁小鼠肝臟的保護作用 1.1動物分組及給藥情況 健康昆明種小鼠100只，雌雄各半，18～22g，分籠飼養(yǎng)，自由飲水及進食。平衡一周后按體重隨機分為5組：陰性對照組、鋁對照組、DFP低、中、高劑量組，每組20只。

3、除陰性對照組給予生理鹽水外，其余各組均灌胃染鋁4周，之后給陰性對照組和鋁對照組以生理鹽水灌胃，對低、中、高劑量組分別以低、中、高劑量的DFP溶液灌胃1周。 1.2 DFP對染鋁小鼠肝重/體重比值的影響 小鼠在最后一次給藥后禁食24小時，記錄體重。完整摘取肝臟，稱取肝重，計算各組小鼠的肝重/體重比值，研究DFP對染鋁小鼠肝重/體重比值的影響。 1.3 DFP對染鋁小鼠血清蛋白和生化指標的影響 小鼠在最后一次

4、給藥后禁食24小時，摘眼球取血，3500rP.m，離心10min，分離上層血清。取血清測定各組小鼠血清中TP、Alb、Glob，A/G，GOT、GPT、AKP、丫—GT含量，研究DFP對染鋁小鼠血清蛋白和各種生化指標的影響。 1.4 DFP對染鋁小鼠肝臟ATP酶活力的影響 取各組小鼠肝臟組織制備組織勻漿，測定Na+K+—ATPase、Ca2+Me2+—ATPase的活力，研究DFP對染鋁小鼠肝臟ATP酶活力的影響。

5、 1.5 DFP對染鋁小鼠肝臟中XOD含量的影響 取各組小鼠肝臟組織勻漿，測定XOD含量，研究DFP對染鋁小鼠肝臟中XOD含量的影響。 1.6 DFP對染鋁小鼠肝臟中鋁及鈣、鎂、鋅、銅、鐵元素含量的影響 取各組小鼠肝臟進行微波消解后，用石墨爐原子吸收分光光度法測肝臟中鋁含量，火焰原子吸收分光光度法測鋅、銅、鐵、鈣、鎂含量，觀察 DFP的排鋁效果以及對肝臟必需元素含量的影響。 1.7 DFP對鋁致小鼠肝臟

6、損傷恢復的形態(tài)學觀察 取各組小鼠肝臟蘇木素—伊紅（HE）染色，進行病理學觀察。 2. DFP對染鋁小鼠腎臟的保護作用 2.1 DFP對染鋁小鼠腎重/體重比值的影響 小鼠在最后一次給藥后禁食24小時，記錄體重。完整摘取腎臟，稱取雙腎重，計算各組小鼠的腎重/體重比值，研究DFP對染鋁小鼠腎重/體重比值的影響。 2.2 DFP對染鋁小鼠SCr和BUN含量的影響 取各組小鼠血清測定SCr和BUN含

7、量，研究DFP對染鋁小鼠腎臟功能的保護作用。 2.3 DFP對染鋁小鼠腎臟勻漿中ATP酶活力的影響 取各組小鼠腎臟制備組織勻漿，測定Na+K+—ATPase、Ca2+Mg2+—ATPase的活力，研究DFP對染鋁小鼠腎臟ATP酶活力的影響。 2.4 DFP對染鋁小鼠腎臟勻漿中XOD含量的影響 取各組小鼠腎臟組織勻漿，測定XOD含量，研究DFP對染鋁小鼠腎臟中XOD含量的影響。 2.5 DFP對小鼠

8、腎臟中鋁及鈣、鎂、鋅、銅、鐵元素含量的影響 取各組小鼠腎臟進行微波消解后，用石墨爐原子吸收分光光度法測腎臟中鋁含量，火焰原子吸收分光光度法測鋅、銅、鐵、鈣、鎂含量，觀察 DFP的排鋁效果以及對腎臟必需元素含量的影響。 2.6 DFP對鋁致小鼠腎臟損傷恢復的形態(tài)學觀察 取各組小鼠腎臟蘇木素—伊紅（HE）染色，進行病理學觀察。 [結果]： 1. DFP對染鋁小鼠肝臟的保護作用 1.1 DFP對

9、染鋁小鼠肝重/體重比值的影響 各組小鼠的肝重/體重比值比較差異均無統(tǒng)計學意義。 1.2 DFP對染鋁小鼠血清蛋白含量和生化指標的影響 各組小鼠血清TP含量比較，鋁對照組顯著低于陰性對照組（P<0.01），低、中、高劑量組與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義。 各組小鼠血清中Alb含量比較，鋁對照組顯著低于陰性對照組（P<0.05），中、高劑量組顯著高于鋁對照組（P<0.05，P<0.01），而與陰性對照組比較

10、差異無統(tǒng)計學意義。各組小鼠血清中Glob含量和A/G比值比較差異均無統(tǒng)計學意義。 染鋁后小鼠血清GOT有增高趨勢，高劑量的DFP使小鼠血清GOT降低。鋁對照組小鼠血清GPT高于陰性對照組，低、中、高劑量組小鼠血清GPT低于鋁對照組。但是各組小鼠血清GOT、GPT含量比較差異均無統(tǒng)計學意義。 各組小鼠血清AKP含量比較，鋁對照組和低、中、高劑量組均顯著高于陰性對照組（P<0.01），低、中、高劑量組與鋁對照組比較差異無統(tǒng)計

11、學意義。 各組小鼠血清中γ—GT含量比較差異無統(tǒng)計學意義。 1.3 DFP對染鋁小鼠肝臟ATP酶活性的影響 各組小鼠肝臟組織Ca2+Mg2+—ATP酶活力比較，鋁對照組、低、中劑量組低于陰性對照組（P<0.01），而高劑量組與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義。各組小鼠肝臟勻漿Na+K+—ATP酶活力比較，鋁對照組低于陰性對照組，給DFP組小鼠較鋁對照組有所回升，但差異均無統(tǒng)計學意義。 1.4 DFP對染鋁小

12、鼠肝臟中XOD含量的影響 各組小鼠肝臟XOD含量比較，鋁對照組、低劑量組、中劑量組顯著高于陰性對照組（P<0.01）。低、中、高劑量組顯著低于鋁對照組（P<0.05，P<0.01）。高劑量組與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義。 1.5 DFP對染鋁小鼠肝臟中鋁及鈣、鎂、鋅、銅、鐵元素含量的影響 各組小鼠肝臟鋁含量比較，鋁對照組顯著高于陰性對照組（P<0.01）；低、中、高劑量組顯著低于鋁對照組（P<0.01），而與

13、陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義。 各組小鼠肝臟鈣含量比較，鋁對照組、低、中劑量組均低于陰性對照組（P<0.05），而高劑量組與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義。 各組小鼠肝臟鎂、鋅、銅含量比較差異均無統(tǒng)計學意義。 各組小鼠肝臟鐵含量比較，鋁對照組略高于陰性對照組，但無統(tǒng)計學意義；低、中、高劑量組的鐵含量均低于鋁對照組和陰性對照組（P<0.01）。 1.6 DFP對鋁致小鼠肝臟損傷恢復的形態(tài)學觀察 鋁

14、對照組小鼠肝細胞變性，肝血竇擴張充血，肝細胞條索排列紊亂。低、中、高劑量組均有不同程度的肝細胞氣球樣變，血竇充血，肝細胞條索排列變得條理。 2. DFP對染鋁小鼠腎臟的保護作用 2.1 DFP對染鋁小鼠腎重/體重比值的影響 各組小鼠的腎重/體重比值差異比較均無統(tǒng)計學意義。 2.2 DFP對染鋁小鼠SCr和BUN含量的影響 各組小鼠SCr含量比較差異無統(tǒng)計學意義。 各組小鼠BUN含量比較，鋁

15、對照組、低、中、高劑量組均高于陰性對照組（P<0.01），低、中、高劑量組均低于鋁對照組，但僅高劑量組與鋁對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。 2.3 DFP對染鋁小鼠腎臟勻漿中ATP酶活力的影響 各組小鼠腎臟Na+K+—ATP酶活性比較，鋁對照組顯著低于陰性對照組（P<0.01）；低、中、高劑量組均高于鋁對照組（P<0.01），而與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義。各組小鼠腎臟Ca2+Mg2+—ATP酶活性比較，

16、鋁對照組顯著低于陰性對照組（P<0.01）；低、中、高劑量組均高于鋁對照組（P<0.01），而與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義。 2.4 DFP對染鋁小鼠腎臟勻漿中XOD含量的影響 各組小鼠腎臟XOD含量比較，鋁對照組顯著高于陰性對照組（P<0.01），低、中、高劑量組顯著低于鋁對照組（P<0.01），而與與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義。 2.5 DFP對小鼠腎臟中鋁及鈣、鎂、鋅、銅、鐵元素含量的影響

17、各組小鼠腎臟鋁含量比較，鋁對照組、低、中、高劑量組顯著高于陰性對照組（P<0.01，P<0.05）；低、中、高劑量組顯著低于鋁對照組（P<0.01）。 各組小鼠腎臟鈣含量比較，鋁對照組、低、中、高劑量組均低于陰性對照組（P<0.05），低、中、高劑量組比鋁對照組略高，但差異無統(tǒng)計學意義。 各組小鼠腎臟鎂、鋅、銅、鐵含量比較差異均無統(tǒng)計學意義。 2.6 DFP對染鋁小鼠腎臟損傷恢復的形態(tài)學觀察 鋁對照組小鼠