2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、研究目的: 觀察肝腎聯(lián)合移植術中移植肝對移植腎的保護作用,并初步探討其可能的機制。 材料與方法: 一、改良式大鼠腎移植模型的建立。 SD大鼠為供受體。供體切取范圍包括左腎、左腎動靜脈、左輸尿管、膀胱、腹主動脈(腹腔動脈以下至左腎動脈下方約0.8cm)、后腔靜脈,后腔靜脈反轉固定于自制的Cuff管上。受體動脈重建:受體暴露左腎動脈以后全長腹主動脈,于中點處剪斷,以硬膜外導管作內(nèi)支架,連續(xù)吻合供受體腹主動脈,

2、吻合上口時,硬膜外導管由供體腹主動脈下方開口穿入,上方開口穿出進入受體上段腹主動脈;吻合下口時,硬膜外導管由腸系膜前動脈穿出。動脈重建完畢后,拔出硬膜外導管,結扎腸系膜前動脈。靜脈重建:供體后腔靜脈遠心端與受體左腎靜脈行端端吻合。輸尿管重建:供體膀胱瓣與受體膀胱全層縫合。 二、大鼠肝腎聯(lián)合移植模型的建立。 SD大鼠為供、受體。自制部分手術小器械;整塊切取供鼠肝臟、腎;供肝肝上下腔靜脈用顯微外科技術縫合,雙袖套法吻合腎下下

3、腔靜脈及門靜脈,右腎動脈采用顯微外科技術與受體腎動脈吻合,用支架管重建膽道和輸尿管。術后采取復溫、補液、抗感染等綜合措施。 三、肝腎聯(lián)合移植中移植肝保護移植腎的實驗研究 實驗分兩組:肝腎聯(lián)合移植組(CLKT)和腎移植組(OKT),均由Wistar大鼠為供體,雄性SD大鼠為受體。按第一、二部分描述的方法進行腎移植和肝腎聯(lián)合移植,術后第5天取移植腎組織,進行HE染色、Masson染色、PAS染色、PASM染色,光鏡下觀察病理

4、改變,參照Banff97標準進行診斷,根據(jù)Watanabe的方法進行急性排斥反應嚴重程度的半定量評分。比較兩組評分的差異。 四、CLKT和OKT組T細胞亞群的變化比較及其意義。 采用流式細胞技術測定CLKT、OKT以及對照組靜脈血T細胞亞群及T細胞表面共刺激分子CD28、CD152和ICOS的表達。 五、肝腎聯(lián)合移植perforin、FasLmRNA的表達及其意義。 OKT組和CLKT組均為7例腎移植。術

5、后第五天,采取受鼠靜脈血標本,采用熒光定量PCR方法perforin、FasLmRNA的表達水平。 結果: 一、大鼠腎移植新術式的效果。 供體手術時間為42±3min;受體手術時間為90±10min。供體器官熱缺血時間為≤2s,冷缺血時間≤100min。53例次手術中,成功48例,手術成功率為90.6%(48/53)。術后出現(xiàn)尿漏2例,輸尿管入膀胱處狹窄1例,移植腎靜脈栓塞1例,術后并發(fā)癥發(fā)生率8.33%(4/4

6、8)。 二、大鼠肝腎聯(lián)合移植模型的建立。 供體手術時間為38±5min;受體無肝期為19.7±3min;受體手術時間為81±13min。供體器官熱缺血時間為≤4s,冷缺血時間≤83min;手術成功率為87.1%(183/210);術后門靜脈栓塞等近期并發(fā)癥的發(fā)生率為12.9%(27/210)。 三、肝腎聯(lián)合移植中移植肝保護移植腎的實驗研究。 CLKT組和OKT移植腎的半定量評分分別為(1.33±0.82)

7、和(4.33±0.82)。兩組評分有統(tǒng)計學意義(p<0.05),OKT組明顯高于CLKT組。 四、CLKT和OKT組T細胞亞群的變化分析。 CD3+T淋巴細胞總數(shù)在CLKT、OKT以及Contr組間無明顯差異(P>0.05),但CD4+CD3+T淋巴細胞總數(shù)為OKT組最高,CLKT組其次,Contr組最低,有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。CLKT組和Contr組CD8+CD3+T淋巴細胞無明顯差異(P>0.05),但均顯著

8、低于OKT組(P<0.05)。三組中CD4+/CD8+比值變化有明顯差異,OKT組最高,CLKT組其次,Contr組最低(P<0.05)。三組CD28%表達有顯著差異,OKT組最高,CLKT組其次,Contr組最低(P<0.05)。三組CD152%有顯著差異,CLKT組最高,OKT組其次,Contr組最低(P<0.05)。而ICOS的表達情況跟CD28相似,OKT組最高,CLKT組其次,Contr組最低,均有統(tǒng)計學意義。 五、肝

9、腎聯(lián)合移植perforin、FasLmRNA的表達。 OKT組移植腎標本中P、FasLmRNA的表達水平為(50.03±26.04)×106拷貝/ugRNA、(4.35±1.64)×106拷貝/ugRNA,而CLKT組P、FasLmRNA的表達水平分別達到(3.41±1.55)×106拷貝/ugRNA和(0.14±0.38)×106拷貝/ugRNA,兩組基因的表達均有顯著性差異(p<0.001),OKT組明顯高于CLKT組。OK

10、T組外周血標本中P、FasLmRNA的表達水平為(500.34±34.06)×106拷貝/ugRNA、(43.54±14.60)×106拷貝/ugRNA,而CLKT組P、FasLmRNA的表達水平分別達到(260.38±15.53)×106拷貝/ugRNA和(16.38±3.81)×106拷貝/ugRNA,兩組基因的表達均有顯著性差異(p<0.001),OKT組明顯高于CLKT組。 結論: 1.本研究建立的大鼠腎移植和肝

11、腎聯(lián)合移植模型,具有操作簡單、對手術器械和術者的顯微外科技能要求低、成功率高、并發(fā)癥少等優(yōu)點,是進行基礎研究的良好動物模型; 2.肝腎聯(lián)合移植術中,移植肝臟對移植腎臟有保護作用,能降低移植腎排斥反應的程度; 3.肝腎聯(lián)合移植術中,T淋巴細胞的成熟、活化受到抑制,同時抑制了正性共刺激分子CD28和ICOS的表達,促進負性共刺激分子CD152的表達,從而達到保護移植腎的作用; 4.肝腎聯(lián)合移植術中,perforin和

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