2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本研究以紅富士蘋果繼代試管苗葉片為試驗(yàn)材料,結(jié)合石蠟切片法對(duì)葉片離體培養(yǎng)下不定芽的形態(tài)發(fā)生進(jìn)行了較系統(tǒng)的解剖觀察,研究了不定芽的發(fā)生途徑、分化時(shí)間及起源部位等,對(duì)葉片不定芽再生過(guò)程中一系列生理生化指標(biāo)進(jìn)行了測(cè)定,對(duì)比分析了光照培養(yǎng)和黑暗培養(yǎng)及培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素種類對(duì)各生理生化因子的影響,旨在探討各因子在不定芽發(fā)生過(guò)程中的作用機(jī)制,以期為葉片再生不定芽調(diào)控提供理論依據(jù);此外,試驗(yàn)還對(duì)影響葉片再生的主要因素即細(xì)胞分裂素種類及配比、暗培養(yǎng)時(shí)間

2、、碳源、繼代苗齡等多方面進(jìn)行研究,以期建立并優(yōu)化高效、穩(wěn)定的紅富士蘋果離體葉片再生體系,從而為其遺傳改良奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
   1.紅富士蘋果離體葉片不定芽起源及發(fā)育的研究結(jié)果表明:不定芽的發(fā)生過(guò)程是,葉片接種4d左右為細(xì)胞啟動(dòng)分化階段,隨后細(xì)胞加速分裂,培養(yǎng)7~10d時(shí)形成分生細(xì)胞團(tuán),培養(yǎng)到14d時(shí)形成不定芽原基,14d以后不定芽原基開始向完整的不定芽分化,培養(yǎng)到18~21d時(shí)不定芽形成,21d以后不定芽開始伸長(zhǎng)生

3、長(zhǎng);研究還發(fā)現(xiàn)紅富士蘋果離體葉片不定芽的起源部位主要是葉片表皮細(xì)胞和葉片維管束周圍的維管束鞘細(xì)胞,屬于多起源;發(fā)生途徑具有多樣性。
   2紅富士蘋果離體葉片不定芽再生過(guò)程中生理生化變化2.1內(nèi)源激素含量及平衡的變化葉片細(xì)胞啟動(dòng)分化期需要較高含量的ZR、IAA和ABA,且暗培養(yǎng)下內(nèi)源激素含量高于光培養(yǎng)的,細(xì)胞旺盛分裂期需要高含量的ZR和ABA及低含量的IAA;且暗培養(yǎng)下內(nèi)源激素含量高于光培養(yǎng)的。不同外源細(xì)胞分裂素對(duì)內(nèi)源激素變化的

4、影響存在顯著差異,TDZ誘導(dǎo)的葉片內(nèi)源ZR和ABA含量顯著高于BA誘導(dǎo)的,IAA的含量顯著低于BA誘導(dǎo)的。內(nèi)源ZR/IAA與ABA/IAA的比值均呈現(xiàn)先升高再降低、再升高-降低的趨勢(shì),且光下培養(yǎng)的比值低于暗培養(yǎng)的,TDZ誘導(dǎo)的比值高于BA誘導(dǎo)的。GA3的結(jié)果表明,其對(duì)葉片不定芽再生有負(fù)作用。綜合分析,不定芽再生需要較高含量的ZR和ABA及一定量的IAA,同時(shí)細(xì)胞啟動(dòng)分化期和芽原基形成階段高比值的ZR/IAA和ABA/IAA有利于不定芽的

5、分化。
   2.2內(nèi)源多胺含量及平衡的變化葉片離體培養(yǎng)過(guò)程中,內(nèi)源多胺含量峰值均出現(xiàn)在培養(yǎng)前期,Put含量高峰出現(xiàn)在培養(yǎng)3d時(shí),而Spm和Spd的高峰出現(xiàn)在培養(yǎng)7d時(shí)。光培養(yǎng)下的內(nèi)源多胺含量顯著低于暗培養(yǎng)下的,TDZ誘導(dǎo)的葉片內(nèi)源多胺含量顯著高于BA誘導(dǎo)的。結(jié)果表明,在葉片細(xì)胞啟動(dòng)分化期及不定芽原基誘導(dǎo)初期需要高含量的內(nèi)源多胺,并且在不定芽分化時(shí)期內(nèi)源多胺含量也一直維持在較高水平;同時(shí)各內(nèi)源多胺之間的比值也是前期處于較高水平,

6、但是比值之間的差異不明顯??梢姡欢ㄑ吭偕枰^高含量的內(nèi)源多胺,且內(nèi)源多胺的平衡對(duì)不定芽的誘導(dǎo)有一定的影響。
   2.3酶活性的變化葉片離體培養(yǎng)過(guò)程中,在葉片培養(yǎng)初期及后期較高的SOD酶活性有利于葉片不定芽的分化及發(fā)育;在后期較高的POD酶活性有利于不定芽發(fā)育;培養(yǎng)前期較低水平的CAT酶活性有利于不定芽的誘導(dǎo),培養(yǎng)后期較高的CAT酶活性有利于不定芽的形成;IOD酶活性變化比較復(fù)雜,且IOD活性與IAA含量密切相關(guān)。
 

7、  2.4 NO含量的變化葉片離體培養(yǎng)以后,葉片內(nèi)NO含量明顯提高。首先,葉片細(xì)胞啟動(dòng)分化期及細(xì)胞旺盛分裂期需要維持較高水平的NO含量,才能誘導(dǎo)不定芽原基的產(chǎn)生;其次,在培養(yǎng)后期也需要較高含量的NO才有利于不定芽的發(fā)育。在不定芽誘導(dǎo)過(guò)程中,光下培養(yǎng)的葉片NO含量顯著低于暗培養(yǎng)的;TDZ誘導(dǎo)的葉片NO含量高于BA誘導(dǎo)的。
   3紅富士蘋果離體葉片高效再生不定芽體系的優(yōu)化結(jié)果表明:較適宜葉片再生不定芽的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為TDZ 6.0

8、 mg/L+NAA 0.1 mg/L,最適宜的暗培養(yǎng)時(shí)間為3周,最適宜的糖為蔗糖,最佳的繼代苗齡為25d左右。在上述培養(yǎng)條件下紅富士蘋果離體葉片再生率達(dá)到100%,平均葉片再生芽數(shù)達(dá)到10.6個(gè)。另外,卡那霉素能顯著抑制紅富士蘋果葉片不定芽再生,但因固化劑不同其抑制效果不同,在6.2 g/L瓊脂做固化劑時(shí),10 mg/L卡那霉素可完全抑制葉片再生,而在5.0 g/L Polygel的培養(yǎng)基上,卡那霉素50 mg/L才能完全抑制葉片再生。

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