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1、目的:選擇腎小球足細(xì)胞上的特異蛋白podocalyxin作為足細(xì)胞的標(biāo)志物,采用PE-鼠抗人podocalyxin單克隆抗體,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)尿液中podocalyxin蛋白陽(yáng)性的細(xì)胞和/或細(xì)胞碎片的數(shù)目(PCX+EL),以評(píng)估糖尿病腎病患者腎小球足細(xì)胞的損傷情況,探討PCX+EL在早期糖尿病腎病中的診斷價(jià)值。
方法:共收集68例自2012年1月到10月期間在山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院就診的糖尿病腎病患者。根據(jù)尿白蛋白/肌酐比值(U
2、ACR)水平,將68例患者分成三組:正常蛋白尿組(UACR<30 mg/g)21例;微量蛋白尿組(UACR30-300 mg/g)25例;大量蛋白尿組(UACR>300 mg/g)22例。28例健康對(duì)照為隨機(jī)抽取的在2012年1月到10月期間來(lái)山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院體檢中心進(jìn)行健康體檢的健康人群。⑴采用流式細(xì)胞儀,用PE-鼠抗人podocalyxin單克隆抗體,檢測(cè)受檢者尿液中podocalyxin蛋白陽(yáng)性的細(xì)胞和/或細(xì)胞碎片(PCX+E
3、L)的數(shù)量。⑵采用免疫比濁法檢測(cè)受檢者血清中胱抑素C的含量,并收集受檢者血肌酐的測(cè)定值。⑶分析比較尿液PCX+EL、血清胱抑素C和血肌酐在糖尿病腎病患者和健康對(duì)照中的含量,以及以上三種標(biāo)志物分別在糖尿病腎病患者各個(gè)分組中含量與健康對(duì)照組的比較。⑷運(yùn)用斯皮爾曼相關(guān)性分析法分析受檢者尿液PCX+EL與尿蛋白、血清胱抑素C和血肌酐含量的相關(guān)性。⑸運(yùn)用非參數(shù)ROC曲線,分析比較尿液PCX+EL、血清胱抑素C和血肌酐這三種標(biāo)志物對(duì)糖尿病腎病的診斷
4、效能。
結(jié)果:①在糖尿病腎病患者與健康對(duì)照組的比較中,糖尿病腎病患者組尿液PCX+EL(p<0.001)、血清胱抑素C(p<0.001)和血肌酐(p=0.001)的量都顯著高于健康對(duì)照組。②在各組糖尿病腎病患者中,尿液PCX+EL值在正常蛋白尿組(p<0.001)、微量蛋白尿組(p<0.001)和大量蛋白尿組(p<0.001)都高于健康對(duì)照組;血清胱抑素C的量在微量蛋白尿組(p<0.001)和大量蛋白尿組(p<0.001)比健
5、康對(duì)照組高,麗它在正常蛋白尿組(p=0.142)的量與健康對(duì)照相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;血肌酐僅僅在大量蛋白尿組(p<0.001)比健康對(duì)照高,而在正常蛋白尿組(p=0.117)和微量蛋白尿組(p=0.433)與健康對(duì)照相比都無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③相關(guān)性比較結(jié)果表明,受檢者尿液PCX+EL與尿白蛋白(r=0.766,p<0.001)、血清胱抑素C(r=0.785,p<0.001)和血肌酐(r=0.436,p<0.001)都有較強(qiáng)的相關(guān)性。⒁非參數(shù)RO
6、C曲線分析結(jié)果表明,在診斷糖尿病腎病時(shí),尿PCX+EL(0.966)的曲線下面積顯著高于血清胱抑素C(0.857)和血肌酐(0.726)的曲線下面積。并且通過(guò)曲線下面積兩兩比較發(fā)現(xiàn),他們之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z檢驗(yàn),p<0.05)。根據(jù)尤登指數(shù)法,尿液PCX+EL的cutoff值為3.86 arb.units/umol時(shí),尤登指數(shù)為最大值,此時(shí),靈敏度和特異度分別為92.6%和96.4%。
結(jié)論:在早期糖尿病腎病患者尿液中可
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