乳腺癌中Twist、E-cadherin和ER基因的表達(dá)及相關(guān)研究.pdf

1、目的:本研究通過(guò)檢測(cè)人乳腺癌細(xì)胞株和乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中扭曲基因(Twist)、E-鈣粘附素(E-cadherin)、雌激素受體(ER)的表達(dá)水平及其相關(guān)性分析，探討三者在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中的作用，為患者的預(yù)后判斷及治療提供一定參考依據(jù)。
　　 方法:1、采用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)4種具有不同侵襲、轉(zhuǎn)移能力的乳腺癌細(xì)胞株(MDA-MB-435、MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7)和16

2、例人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌(invasive ductal carcinoma, IDC)及癌旁組織中Twist、E-cadherin和ER的mRNA表達(dá)情況，分析Twist、E-cadherin、ER mRNA表達(dá)的相關(guān)性及與乳腺癌轉(zhuǎn)移潛能的關(guān)系;
　　 2、采用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IHC)法檢測(cè)4種乳腺癌細(xì)胞株和16例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌及癌旁組織中Twist、E-cadherin和ER蛋白的表達(dá)并

3、分析三種蛋白表達(dá)相關(guān)性。
　　 3、應(yīng)用SPPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理數(shù)據(jù)，RT-PCR法檢測(cè)乳腺癌和癌旁組織中Twist、E-cadherin、ER表達(dá)結(jié)果比較采用t檢驗(yàn)，免疫組化結(jié)果比較采用Fisher精確概率法，相關(guān)性分析用非參數(shù)相關(guān)性Spearman檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)均取雙側(cè)α=0.05，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:1、RT-PCR法檢測(cè)結(jié)果顯示，4種乳腺癌細(xì)胞株中，Twist在低侵襲低轉(zhuǎn)移的乳

4、腺癌細(xì)胞株MCF-7中低表達(dá)，在高轉(zhuǎn)移高侵襲的MDA-MB-435、MDA-MB-231和ZR75-30細(xì)胞株中均為高表達(dá)，ER和E-cadherin與Twist表達(dá)情況則相反，在MCF-7細(xì)胞株中表達(dá)量最高，在MDA-MB-231、MDA-MB-435和ZR75-30細(xì)胞株中微弱表達(dá)或不表達(dá);在浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌和癌旁組織中，Twist表達(dá)量分別為1.05±0.52、0.25±0.13，E-cadherin表達(dá)量分別為0.03±0.03、0

5、.11±0.06，ER表達(dá)量分別為0.04±0.03、0.37±0.31，兩者差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);
　　 2、免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:Twist蛋白在低侵襲性人乳腺癌MCF-7細(xì)胞株中幾乎不表達(dá)，而在其它三種高侵襲性人乳腺癌細(xì)胞株中均呈高表達(dá)，且表達(dá)水平與乳腺癌侵襲特性呈正相關(guān);E-cadherin蛋白和ER蛋白在低侵襲性人乳腺癌MCF-7細(xì)胞株相對(duì)高表達(dá)，而在其它三種高侵襲性人乳腺癌細(xì)胞株中低表達(dá)或不表達(dá)，

6、表達(dá)水平與乳腺癌侵襲特性呈負(fù)相關(guān);在16例乳腺癌和癌旁組織中，Twist蛋白陽(yáng)性率分別為81.3％和25％，前者表達(dá)明顯高于后者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，E-cadherin和ER蛋白在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為31.3％、37.5％，明顯低于癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)率(75％、87.5％)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);
　　 3、三種基因mRNA及蛋白表達(dá)相關(guān)性分析:在mRNA水平及蛋白水平，Twist與E-

7、cadherin(r=-0.787,P＜0.05; r=-0.713,P＜0.01)、Twist與ER(r=-0.741，P＜0.05; r=-0.620，P＜0.05)的表達(dá)均呈負(fù)相關(guān);E-cadherin和ER表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.854，P＜0.01; r=0.592，P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中，Twist mRNA及蛋白過(guò)表達(dá)，E-cadherin、ER mRNA及蛋白低表達(dá)，

8、提示三者可能與乳腺癌發(fā)生發(fā)展有關(guān);
　　 2.乳腺癌細(xì)胞株和組織標(biāo)本中Twist的高表達(dá)和E-cadherin、ER的低表達(dá)與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力相關(guān)，提示三者可能參與了乳腺癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移過(guò)程;
　　 3.乳腺癌中Twist與E-cadherin、ER的表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)，E-cadherin與ER的表達(dá)呈正相關(guān)，提示聯(lián)合檢測(cè)Twist和E-cadherin和ER指標(biāo)，將為進(jìn)一步預(yù)測(cè)乳腺癌的轉(zhuǎn)移、預(yù)后判斷以及指導(dǎo)臨床選擇治療方