彎曲菌分離株P(guān)FGE分型、耐藥性和毒力基因分布及相關(guān)性分析.pdf

1、彎曲菌(Campylobacter)是一種自限性革蘭氏陰性菌，能引起全球范圍內(nèi)腸道疾病，嚴(yán)重的能夠?qū)е律窠?jīng)性疾病，引起人類彎曲菌病的主要是空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌。彎曲菌普遍定存在家禽體內(nèi)尤其是雞腸道，通過糞便排泄不斷污染環(huán)境，人類直接接觸或者消費(fèi)雞肉產(chǎn)品等間接途徑會感染彎曲菌。近年來彎曲菌病的發(fā)生率及其耐藥性的不斷上升，嚴(yán)重影響人類健康。控制污染源、限制抗生素的使用可以提高彎曲菌病的治愈率。本研究主要目的是:(1)應(yīng)用脈沖場凝膠電泳方法

2、(pulsed-field gel electrophoresis，PFGE)對不同來源彎曲菌分離株進(jìn)行PFGE分型，結(jié)合耐藥性分析和毒力基因分布分析探究兩者間的親緣關(guān)系，最后對三種方法間的相關(guān)性進(jìn)行研究。(2)對某屠宰廠雞肉生產(chǎn)加工環(huán)節(jié)的彎曲菌分離株進(jìn)行脈沖場凝膠電泳同源性分析，結(jié)合耐藥性和毒力基因分布分析探究整個(gè)生產(chǎn)環(huán)節(jié)的交叉污染情況。
　　 一、空腸彎曲菌分離株P(guān)FGE、耐藥性和毒力基因分型分析及相關(guān)性
　　 本研

3、究對揚(yáng)州市腹瀉病人、雞源和牛源空腸彎曲菌分離株進(jìn)行PFGE、耐藥性和毒力基因分布的研究。結(jié)果顯示88株不同來源空腸彎曲菌分離株可分為9個(gè)PFGE型(PFGE types，PTs)，其中PT9包含30株細(xì)菌，占細(xì)菌總量的34.1％，為揚(yáng)州地區(qū)主要PT。PT9中人源和雞源空腸彎曲菌分離株居多，占PT9菌株總量的86.7％。其他PTs所包含菌株中，人源和雞源彎曲菌同時(shí)存在的比例也較高，表明人源菌株和雞源菌株親緣關(guān)系近，人群腹瀉可能和雞相關(guān)。<

4、br>　　 同一PT中，多數(shù)細(xì)菌毒力基因分布相似，少數(shù)細(xì)菌毒力基因分布存在完全相同，如PT2中57.1％的人源菌株毒力基因完全相同，PT9中63.6％的雞源菌株毒力基因分布完全相同。同源性相對較低的PT2和PT3菌株，黏附類毒力基因的分布差異較大。不同PTs菌株的脂多糖、毒素以及趨向性類毒力基因分布差異較小，很多菌株表現(xiàn)出完全相同的分布。PT8和PT9的人源空腸彎曲菌PO-10、PO-17-7、PO-18-2等毒力基因分布相似，耐藥性

5、只在頭孢哌酮上表現(xiàn)不同。PT7的牛源菌株XN-4-2、DJ-2-4、TZDN-8毒力基因分布差異很小，其耐藥性高度相似。
　　 研究結(jié)果表明，空腸彎曲菌分離株的PT和毒力基因、耐藥性不存在一一對應(yīng)關(guān)系，但不同PTs空腸彎曲菌分離株中毒力基因相似度不同，PT8和PT9中人源菌株和雞源、牛源菌株的耐藥性相似度高。
　　 二、雞肉生產(chǎn)加工環(huán)節(jié)彎曲菌交叉污染監(jiān)測
　　 本研究利用PFGE分型，結(jié)合耐藥性和毒力基因分布分析

6、對南通某雞肉生產(chǎn)加工廠不同屠宰環(huán)節(jié)進(jìn)行交叉污染的監(jiān)測。我們對同一批次雞肉生產(chǎn)加工過程的7個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行監(jiān)測，包括脫毛前、脫毛后、開膛后、盲腸內(nèi)容物、消毒預(yù)冷、包裝、冷凍環(huán)節(jié)。所分離的41株彎曲菌中，結(jié)腸彎曲菌38株，空腸彎曲菌3株。研究結(jié)果顯示，38株結(jié)腸彎曲菌可以分為3個(gè)PTs，同源性高于90％。不同環(huán)節(jié)分離株P(guān)T普遍相同，說明不同環(huán)節(jié)分離株同源性較高。其中PT2的F46、F6，和PT3的B14、D52、F44、D59毒力基因分布和耐藥性

7、完全相同，說明這些菌株有可能來源于同一個(gè)體，反映了屠宰過程不同加工環(huán)節(jié)彎曲菌存在交叉污染現(xiàn)象。
　　 從屠宰環(huán)節(jié)來看，開膛后、盲腸內(nèi)容物、包裝環(huán)節(jié)都存在耐藥性和毒力基因分布完全一致的細(xì)菌，說明同一環(huán)節(jié)可能存在交叉污染現(xiàn)象。除消毒預(yù)冷、冷凍環(huán)節(jié)，開膛后、脫毛后、盲腸內(nèi)容物、包裝環(huán)節(jié)毒力基因分布相同的菌株比較多，說明了開膛后、脫毛后、盲腸內(nèi)容物、包裝環(huán)節(jié)交叉污染比較嚴(yán)重，脫毛前、消毒預(yù)冷和冷凍環(huán)節(jié)交叉污染輕。
　　 PFGE