雞桿菌地方分離株耐藥性及耐藥基因的研究.pdf

1、雞桿菌以侵害蛋雞的呼吸道和生殖道為主,但其對雞具體的致病性機制尚不清楚。目前,國內外有關雞桿菌耐藥狀況的報道較小,養(yǎng)殖戶在臨床用藥時,缺乏可靠的理論依據(jù),用藥比較盲目,往往造成嚴重的經(jīng)濟損失,因此開展雞桿菌地方分離株耐藥性及耐藥基因的研究調具有十分重要的意義。本研究首先對雞桿菌的耐藥性進行了調查,在此基礎上,進行質粒介導的鏈霉素和磺胺物耐藥機制的研究及雞桿菌對氟喹諾酮類藥物耐藥機制的研究；為了便于耐藥性和耐藥基因的調查,對鏈霉素耐藥基因

2、三重PCR檢測方法和磺胺類藥物耐藥基因二重PCR檢測方法也進行了研究。
　　 通過雞桿菌的耐藥性調查可知,該細菌對頭孢曲松(CRO)、頭孢哌酮和頭孢吡肟高度敏感,對阿米卡星、慶大霉素、四環(huán)素、強力霉素也也較敏感,但對磺胺甲惡唑、鏈霉素、諾氟沙星,氧氟沙星、環(huán)丙沙星、克林霉素高度耐藥。
　　 根據(jù)已報道的鏈霉素耐藥基因序列設計引物,從雞桿菌的質粒上擴增到了耐藥基因StrA,StrB和aadA,表明雞桿菌對鏈霉素的耐藥性是由

3、StrA、StrB和aadA編碼的鏈霉素鈍化酶引起；根據(jù)已報道的磺胺類藥物的耐藥基因序列設計引物,從雞桿菌的質粒上擴增到了耐藥基因SulⅠ和SulⅡ,表明雞桿菌對磺胺的耐藥性是由SulⅠ和SulⅡ基因編碼對磺胺具有低親和力的二氫碟酸脫氫酶引起。由于雞桿菌的鏈霉素和磺胺類藥物耐藥基因存在于質粒上,而質?？蓪е履退幮缘难杆賯鞑?因此從基因機制方面解釋了雞桿菌對鏈霉素和磺胺具有較高耐藥率的因為。
　　 利用擴增嗜血桿菌和巴氏桿菌氟喹諾

4、酮類藥物耐藥決定區(qū)的簡并引物成功擴增到了雞桿菌的gyrA和parC的部分基因片段,對這兩個基因核苷酸和氨基酸序列進行分析,表明分離的雞桿菌為巴氏桿菌科的一個屬,并且通過gyrA和parC基因QRDR的核苷酸和氨基酸序列進行比對分析,表明雞桿菌對氟喹諾酮類藥物的耐藥性是由于gvrA基因的131位突變導致的氨基酸的改變(See→Phe或Tyr)和parC基因的124位突變導致的氨基酸的改變(Ser→Ile)引起的。
　　 在對單一P