雞桿菌地方分離株耐藥性及耐藥基因的研究.pdf

1、雞桿菌以侵害蛋雞的呼吸道和生殖道為主,但其對(duì)雞具體的致病性機(jī)制尚不清楚。目前,國內(nèi)外有關(guān)雞桿菌耐藥狀況的報(bào)道較小,養(yǎng)殖戶在臨床用藥時(shí),缺乏可靠的理論依據(jù),用藥比較盲目,往往造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,因此開展雞桿菌地方分離株耐藥性及耐藥基因的研究調(diào)具有十分重要的意義。本研究首先對(duì)雞桿菌的耐藥性進(jìn)行了調(diào)查,在此基礎(chǔ)上,進(jìn)行質(zhì)粒介導(dǎo)的鏈霉素和磺胺物耐藥機(jī)制的研究及雞桿菌對(duì)氟喹諾酮類藥物耐藥機(jī)制的研究；為了便于耐藥性和耐藥基因的調(diào)查,對(duì)鏈霉素耐藥基因

2、三重PCR檢測(cè)方法和磺胺類藥物耐藥基因二重PCR檢測(cè)方法也進(jìn)行了研究。
　　 通過雞桿菌的耐藥性調(diào)查可知,該細(xì)菌對(duì)頭孢曲松(CRO)、頭孢哌酮和頭孢吡肟高度敏感,對(duì)阿米卡星、慶大霉素、四環(huán)素、強(qiáng)力霉素也也較敏感,但對(duì)磺胺甲惡唑、鏈霉素、諾氟沙星,氧氟沙星、環(huán)丙沙星、克林霉素高度耐藥。
　　 根據(jù)已報(bào)道的鏈霉素耐藥基因序列設(shè)計(jì)引物,從雞桿菌的質(zhì)粒上擴(kuò)增到了耐藥基因StrA,StrB和aadA,表明雞桿菌對(duì)鏈霉素的耐藥性是由

3、StrA、StrB和aadA編碼的鏈霉素鈍化酶引起；根據(jù)已報(bào)道的磺胺類藥物的耐藥基因序列設(shè)計(jì)引物,從雞桿菌的質(zhì)粒上擴(kuò)增到了耐藥基因SulⅠ和SulⅡ,表明雞桿菌對(duì)磺胺的耐藥性是由SulⅠ和SulⅡ基因編碼對(duì)磺胺具有低親和力的二氫碟酸脫氫酶引起。由于雞桿菌的鏈霉素和磺胺類藥物耐藥基因存在于質(zhì)粒上,而質(zhì)?？蓪?dǎo)致耐藥性的迅速傳播,因此從基因機(jī)制方面解釋了雞桿菌對(duì)鏈霉素和磺胺具有較高耐藥率的因?yàn)椤?br>　　 利用擴(kuò)增嗜血桿菌和巴氏桿菌氟喹諾

4、酮類藥物耐藥決定區(qū)的簡(jiǎn)并引物成功擴(kuò)增到了雞桿菌的gyrA和parC的部分基因片段,對(duì)這兩個(gè)基因核苷酸和氨基酸序列進(jìn)行分析,表明分離的雞桿菌為巴氏桿菌科的一個(gè)屬,并且通過gyrA和parC基因QRDR的核苷酸和氨基酸序列進(jìn)行比對(duì)分析,表明雞桿菌對(duì)氟喹諾酮類藥物的耐藥性是由于gvrA基因的131位突變導(dǎo)致的氨基酸的改變(See→Phe或Tyr)和parC基因的124位突變導(dǎo)致的氨基酸的改變(Ser→Ile)引起的。
　　 在對(duì)單一P