山羊圍著床期子宮中ITGB1、ITGAV、ITGB3和ITGA5的表達(dá)研究.pdf

1、山羊?qū)儆诜雌c動(dòng)物，著床方式為表面著床，胚胎與子宮肉阜上皮細(xì)胞相融合、增生，最后形成的胎盤(pán)為子葉狀胎盤(pán)。胚胎著床是成功建立妊娠的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，涉及到胚胎與母體子宮之間復(fù)雜的相互作用。整合素作為細(xì)胞黏附分子家族成員，是一種細(xì)胞表面結(jié)合蛋白，主要介導(dǎo)粘附和行使信號(hào)傳遞功能，在胚胎著床過(guò)程發(fā)揮重要作用。我們通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序發(fā)現(xiàn):整合素ITGAV(integrinαv，ITGAV)、ITGB3(integrinβ3，ITGB3)和ITGA5(integ

2、rinα5，ITGA5)mRNA在山羊圍著床期(D6、D16和D19)子宮中表達(dá)變化特異。因此本文詳細(xì)研究整合素亞基ITGB1(integrinβ1，ITGB1)、ITGAV、ITGB3、ITGA5蛋白在山羊圍著床子宮中的表達(dá)和激素調(diào)節(jié)，為深入研究整合素在反芻動(dòng)物胚胎著床中的作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　本實(shí)驗(yàn)的目的是檢測(cè)整合素亞基ITGB1、ITGAV、ITGB3和ITGA5在山羊發(fā)情周期、早期妊娠和激素處理子宮中的表達(dá)，來(lái)確定這些整

3、合素亞基是否在山羊胚胎著床中起作用，是否受類(lèi)固醇激素調(diào)控。
　　本實(shí)驗(yàn)材料為黑龍江本地山羊，采用Western blot方法檢測(cè)ITGB1、ITGAV、ITGB3和ITGA5在發(fā)情周期、早期妊娠和激素處理山羊子宮中的表達(dá)和類(lèi)固醇激素調(diào)控;通過(guò)免疫組織化學(xué)技術(shù)研究ITGB3和ITGA5蛋白在山羊著床階段子宮中的定位。本實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果如下:
　　(1)在發(fā)情周期中，Western blot檢測(cè)到ITGB1、ITGAV、ITGB3和

4、ITGA5在山羊整個(gè)發(fā)情周期的子宮中均表達(dá)，ED0表達(dá)較高，排卵后(ED6、ED12)表達(dá)降低，ED16表達(dá)升高。
　　(2)在山羊早期妊娠過(guò)程中，Western blot結(jié)果顯示ITGB1在山羊胚胎粘附和胎盤(pán)形成早期(D16-D30)高表達(dá)，ITGAV、ITGB3和ITGA5在妊娠期表達(dá)基本一致，均在山羊胚胎粘附期(D16)高表達(dá);免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示ITGB3在胚胎粘附期(D16、D19)子宮腔上皮和基質(zhì)中有表達(dá)，ITGA5在

5、子宮腔上皮、腺上皮和基質(zhì)中有表達(dá)。
　　(3)在類(lèi)固醇激素處理模型中，Western blot顯示孕酮上調(diào)ITGB1的表達(dá)，雌激素?zé)o明顯影響;雌激素上調(diào)ITGAV、ITGB3和ITGA5的表達(dá)，孕酮無(wú)明顯影響。
　　本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ITGB1的表達(dá)在山羊子宮中呈現(xiàn)胚胎著床特異性，在胚胎著床和胎盤(pán)形成早期，ITGB1蛋白一直處于高水平。推測(cè)ITGB1參與山羊胚胎著床和胎盤(pán)形成的過(guò)程。孕酮上調(diào)ITGB1的表達(dá)，雌激素?zé)o明顯影響。I

6、TGAV、ITGB3和ITGA5在山羊胚胎粘附期(D16)處于高水平，并且ITGB3表達(dá)于著床期子宮腔上皮和基質(zhì)中，ITGA5表達(dá)于著床期子宮腔上皮、腺上皮和基質(zhì)中，推測(cè)ITGAV、ITGB3和ITGA5在山羊胚胎粘附過(guò)程發(fā)揮著重要作用。雌激素上調(diào)ITGAV、ITGB3和ITGA5的表達(dá)，孕酮無(wú)明顯影響。山羊胚胎著床過(guò)程中，不同的整合素表達(dá)方式不同，類(lèi)固醇調(diào)控機(jī)制不同，可能發(fā)揮不同作用。本實(shí)驗(yàn)為研究整合素在反芻動(dòng)物胚胎著床和胎盤(pán)形成中作