番茄ShWRKY6基因的抗逆功能研究.pdf

1、干旱，高、低溫，高鹽等不利環(huán)境條件會嚴(yán)重影響番茄的品質(zhì)與產(chǎn)量，挖掘野生番茄資源中的優(yōu)良變異基因，并對其進(jìn)行功能研究，為番茄抗逆育種開辟了更直接、更簡便、更有效的途徑。WRKY基因受到外界環(huán)境的刺激而誘導(dǎo)表達(dá)，并廣泛的參與植物的各種生理活動。目前有關(guān)WRKY基因的研究報道大多數(shù)在水稻、擬南芥等作物中，而番茄WRKY基因的研究報道還不多。本研究從野生多毛番茄LA1777中克隆出一個WRKY轉(zhuǎn)錄因子ShWRKY6,構(gòu)建了超量表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化到普

2、通栽培番茄A57中，并對轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行了抗逆性功能研究。主要研究結(jié)果如下:
　　1.ShWRKY6屬于第Ⅱ類b型WRKY蛋白，編碼163個氨基酸，具有典型的WRKY結(jié)構(gòu)域。與普通栽培番茄序列相比，有幾處氨基酸位點(diǎn)的變化和氨基酸的插入及缺失。
　　2.ShWRKY6在LA1777中呈組成型表達(dá)，主要在葉片中表達(dá);誘導(dǎo)表達(dá)分析表明ShWRKY6受到干旱、高鹽、ABA和MV等逆境脅迫誘導(dǎo)表達(dá)。
　　3.構(gòu)建ShWRKY6超表

3、達(dá)載體，并將其轉(zhuǎn)入普通栽培番茄A57，成功獲得轉(zhuǎn)基因植株。
　　4.對五葉一心的苗期轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行抗逆脅迫實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)超表達(dá)植株的抗逆性顯著好于對照。干旱脅迫下，轉(zhuǎn)基因植株的表型明顯好于對照A57，基本保持正常生長，葉片中MDA含量顯著低于對照，脯氨酸和可溶性糖等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)顯著性高于對照，葉片氣孔變小，番茄抗旱相關(guān)基因如CAT、SOD、APX、SlTIP2、MsrB2的表達(dá)量顯著提高，并且復(fù)水后成活率更高。轉(zhuǎn)基岡植株的抗氧化能力提