番茄抗逆相關基因ShZFP1的克隆與功能分析.pdf

1、低溫、干旱、高鹽等非生物脅迫是制約番茄生產和分布的重要因素，發(fā)掘番茄抗逆相關基因并對其進行功能研究，是目前為止解決這一難題最可行的辦法。植物鋅指蛋白是一類數(shù)量龐大的轉錄因子家族，其作用貫穿于植物生長發(fā)育整個過程，植物C2H2型雙鋅指蛋白大多與植物非生物脅迫應答有關，能夠提高轉基因植物的抗逆能力。野生番茄具有抗逆性強等優(yōu)良性狀，是番茄遺傳改良的重要種質資源。本研究根據耐寒芯片分析結果，從野生多毛番茄LA1777中克隆出一個C2H2型鋅指蛋

2、白基因ShZFP1，并對轉基因株系進行了抗逆性功能驗證。主要研究結果如下:
　　1.ShZFP1編碼163個氨基酸，具有C2H2型雙鋅指蛋白典型結構，與矮牽牛ZPT2-12、ZPT2-13具有較高的同源性，與普通栽培番茄序列相比，有兩個氨基酸的插入和幾處氨基酸位點的變化。
　　2.組織表達分析表明ShZFP1在LA1777各組織中呈組成型表達，在根中的相對表達量最高;誘導表達分析表明該基因的表達受低溫、干旱和高鹽等多種逆境脅

3、迫及ABA的誘導。
　　3.構建ShZFP1超量表達載體，利用農桿菌介導的遺傳轉化方法將其轉入普通栽培番茄A57，成功獲得轉基因陽性株系。
　　4.在1/2MS培養(yǎng)基上模擬低溫、干旱和高鹽脅迫，驗證轉基因番茄幼苗對非生物逆境的耐受能力，超表達ShZFP1株系顯著降低了其對低溫、高鹽及滲透脅迫的敏感性，促進幼苗在各脅迫下的生長發(fā)育，改變了番茄抗逆相關marker基因如LeP5CS、SlBADH、SlLEA、、SlCBF1、Sp