金銀花藥材質(zhì)量綜合評價(jià)研究.pdf

1、目的：本課題利用現(xiàn)代分析儀器對金銀花藥材進(jìn)行檢測分析，對金銀花藥材進(jìn)行質(zhì)量綜合評價(jià)研究。優(yōu)化金銀花藥材中指標(biāo)性成分綠原酸和木犀草苷的提取方法；建立超高效液相色譜法（UPLC）同時(shí)測定金銀花中綠原酸、蘆丁、木犀草苷含量的分析方法，替代2010版《中國藥典》金銀花項(xiàng)下含量測定方法評價(jià)金銀花的質(zhì)量；對不同花期、不同月份、不同產(chǎn)地金銀花的指標(biāo)性成分測定，為金銀花的采收花期提供科學(xué)的參考依據(jù)，同時(shí)為不同月份、不同產(chǎn)地的金銀花藥材質(zhì)量提供參考依據(jù)；

2、建立金銀花藥材的HPLC和UPLC指紋圖譜；對金銀花藥材進(jìn)行一般質(zhì)量研究；對金銀花藥材的整體質(zhì)量優(yōu)劣進(jìn)行評價(jià)。
　　方法：通過單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)優(yōu)化金銀花中指標(biāo)性成分綠原酸和木犀草苷提取工藝；采用HPLC法測定金銀花藥材中指標(biāo)性成分綠原酸、蘆丁、木犀草苷的含量；采用 UPLC法測定金銀花中的綠原酸、蘆丁和木犀草苷的含量；建立金銀花藥材的HPLC和UPLC指紋圖譜，分別進(jìn)行相似度分析及聚類分析，并比較兩種指紋圖譜的差異；對金銀花藥

3、材進(jìn)行一般質(zhì)量研究，包括水分測定、總灰分測定和酸不溶性灰分的測定。
　　結(jié)果：通過單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)優(yōu)化：浸泡30min，70％乙醇120倍量，超聲（功率350W，頻率40KHz）提取45min。綠原酸的HPLC色譜條件為： Agilent ZORBAX XDB C18(150×4.6mm，5.0μm)色譜柱，流動相為乙腈（B）-0.2%磷酸水（A）（13：87）等度洗脫，流速1.0 mL/min，檢測波長為327nm，柱溫為3

4、0℃，進(jìn)樣量2.0μL。綠原酸在39.6～297.0μg/mL內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=1.0000，其加樣回收率為97.29%，RSD值為0.48%。蘆丁的HPLC色譜條件： Diamonsil（鉆石）C18(250mm×4.6 mm，5.0μm)色譜柱；流動相為0.5%醋酸水（A）-甲醇（B），梯度洗脫（0～5min，70%A；5～10min，70%～65%A；10～30min，65%A。）流速1.0 mL/min，檢測波長257 n

5、m，柱溫30℃，進(jìn)樣量10.0μL。蘆丁在4.1～41.0μg/mL內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，其加樣回收率為98.08%，RSD為0.30%。木犀草苷的HPLC色譜條件為：Agilent ZOTBAX XDB-Phenyl C18(250×4.6 mm，5.0μm)色譜柱；流動相為乙腈（B）-0.4%冰醋酸溶液(A)，洗脫梯度：0～15min，90%～80%（A）；15～30min，80%（A）；30～40min，80%～70%（A）。流速1

6、.0 mL/min；柱溫30℃；檢測波長350nm；進(jìn)樣量10μL。木犀草苷在2.00～30.0μg/mL內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=0.9996，其加樣回收率為97.91%，RSD值為0.49%。采用UPLC法測定金銀花中的綠原酸、蘆丁和木犀草苷的含量，色譜條件：色譜柱Agilent ZORBAX RH C18(2.1×50mm，1.8μm)，流動相為0.2%磷酸水（A）-乙腈（B），梯度洗脫：0～2 min，13%（B）；2～3 min

7、，13%～25%（B）；3～8 min，25%（B）；流速0.2mL/min，檢測波長350nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量0.5μL。綠原酸、蘆丁和木犀草苷的線性范圍分別為15.84～316.8μg/mL、1.64～32.8μg/mL、1.60～32.00μg/mL，加樣回收率分別為98.99%、98.84%、98.19%。別分建立了不同產(chǎn)地、不同月份金銀花HPLC、UPLC指紋圖譜，對金銀花藥材指紋圖進(jìn)行相似度和聚類分析，金銀花HPLC指紋

8、圖譜獲得22個(gè)共有峰，金銀花UPLC指紋圖譜獲得23共有峰，并確認(rèn)了綠原酸、蘆丁、木犀草苷、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C等色譜峰；HPLC指紋圖譜相似度為0.917～0.992，UPLC指紋圖譜相似度為0.848～0.971。建立金銀花藥材指紋圖譜及其質(zhì)量評價(jià)方法。54批金銀花藥材的水分、總灰分、酸不溶性灰分含量均符合中國藥規(guī)定。
　　結(jié)論：本課題通過對金銀花提取工藝的研究，建立了以綠原酸和木犀草苷含量為指標(biāo)的提取方法；建立