山東產(chǎn)金銀花藥材現(xiàn)代質(zhì)量的應(yīng)用研究.pdf

1、金銀花又名忍冬花、銀花、金花、雙花等,為忍冬科植物忍冬(Lonicerajaponica Thunb.)的干燥花蕾或帶初開的花,應(yīng)用歷史悠久,用途十分廣泛,主產(chǎn)于山東、河南等地,在我國廣泛種植。金銀花具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱之功效,近年來市場需求量不斷擴大,供求矛盾日益突出。此外,山銀花(Lonicera confusaDC.)、腺葉忍冬(L.hypoglauca Mip.)、毛花柱忍冬(L.dasystyla Rehd.)等同屬植物的花

2、蕾在少數(shù)地區(qū)亦作金銀花入藥。蒙山紅金銀花為蒙山自然野生金銀花變異型品種,也有人進行引種栽培。我國金銀花產(chǎn)地多,品種復(fù)雜,常發(fā)現(xiàn)多品種混合種植和藥材中混雜其他品種的現(xiàn)象,不僅影響藥材質(zhì)量,也對療效產(chǎn)生不良影響。山東為金銀花的主要道地藥材產(chǎn)地,種植面積和產(chǎn)量均達到一定規(guī)模。文獻顯示,現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準難以綜合評價金銀花整體質(zhì)量,山東產(chǎn)金銀花現(xiàn)代質(zhì)量研究亦較少,為了客觀評價、有效控制藥材質(zhì)量和充分利用山東金銀花藥材的資源優(yōu)勢,發(fā)展藥材產(chǎn)業(yè),根據(jù)中藥

3、現(xiàn)代化和標(biāo)準化的要求,運用現(xiàn)代色譜-波譜技術(shù),對山東產(chǎn)金銀花藥材質(zhì)量進行了較系統(tǒng)全面的研究,并與外省區(qū)藥材及其它品種進行對比,為金銀花藥材質(zhì)量標(biāo)準的建立提供科學(xué)的方法和數(shù)據(jù)。
　　 較系統(tǒng)收集了山東、河南、河北、湖南、湖北等產(chǎn)地的藥材,選用道地藥材山東省平邑縣金銀花為主要研究對象,進行定性、定量分析。
　　 采用高效液相色譜法建立金銀花、紅金銀花及山銀花的指紋圖譜,以水(0.1％磷酸)-乙腈為流動相進行二元梯度洗脫,檢測

4、波長238nm和190nm-400nm全波長掃描,色譜柱SHISEIDO CAPCELL PAK CR(250mm×4.6mm.5μm),柱溫25℃,分析時間60min。實驗共得到金銀花藥材共有峰13個,并在指紋圖譜基礎(chǔ)上,結(jié)合相似度分析、聚類分析,對建立的HPLC指紋圖譜進行評價。相似度分析結(jié)果顯示,不同省份產(chǎn)金銀花差異較大,紅金銀花與金銀花有明顯差異,湖南產(chǎn)山銀花與湖南產(chǎn)金銀花HPLC指紋圖譜較相似,這與聚類分析結(jié)果基本一致;相同產(chǎn)

5、地的金銀花藥材、紅金銀花藥材、山銀花藥材各自10批間相似度較高,說明圖譜具有良好的重現(xiàn)性。
　　 通過頂空-氣質(zhì)聯(lián)用法分析了金銀花、紅金銀花和山銀花的揮發(fā)性、半揮發(fā)性成分,對項空預(yù)熱溫度、預(yù)熱時間和稱樣量等進行考察,建立較系統(tǒng)的金銀花頂空樣品制備方法,通過計算機譜庫檢索并與標(biāo)準圖譜對照,對化合物進行鑒定,3種藥材共鑒定出59種主要成分(其中金銀花45種、紅金銀花52種、山銀花51種),發(fā)現(xiàn)紅金銀花含氮雜環(huán)化合物的相對含量明顯高于

6、金銀花、山銀花二者。采用頂空-氣質(zhì)聯(lián)用法分析金銀花、紅金銀花和山銀花的揮發(fā)性、半揮發(fā)性成分的研究目前尚未發(fā)現(xiàn)有報道。
　　 采用高效液相色譜法,建立了金銀花藥材綠原酸、當(dāng)藥苷、金絲桃苷和木犀草苷4個化學(xué)成分同時進行含量測定的方法,線性關(guān)系良好,回歸方程的相關(guān)系數(shù)分別為0.9994、0.9999、0.9975和0.9998,平均回收率均在99.66％-101.00％之間,相對標(biāo)準偏差均≤2.55％。4個化合物的含量在金銀花、山銀花

7、和紅金銀花間存在一定差異,以綠原酸為評價指標(biāo),除Q14號樣品幾乎無綠原酸外,其余均達到要求,并以Q13號樣品綠原酸含量最多,且購買的金銀花藥材綠原酸含量均較高(幾乎均大于2％),綠原酸的含量在存放后有明顯降低。
　　 利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用和液相色譜-DAD技術(shù),綜合總離子流色譜圖和HPLC-DAD色譜圖,對山東產(chǎn)金銀花藥材進行化學(xué)成分定性分析及化學(xué)模式識別相關(guān)性分析。根據(jù)質(zhì)譜峰分子離子數(shù)據(jù)并參考液相色譜峰光譜數(shù)據(jù)確定了11個色

8、譜峰的可能結(jié)構(gòu),分別為馬錢素、獐牙菜苦苷、綠原酸、當(dāng)藥苷、異綠原酸、Secoxyloganin、Epi-vogeloside、金絲桃苷、木犀草苷、Aldosccologanin、4,5-diCQA。
　　 對金銀花藥材高效液相指紋圖譜和氣相色譜質(zhì)譜圖譜進行系統(tǒng)聚類分析進行比較,結(jié)果兩種方法的聚類分析結(jié)果基本一致,山東產(chǎn)金銀花藥材差異較小,紅金銀花與金銀花藥材有較大差異,山銀花不能與金銀花、紅金銀花聚為一類。采用HPLC、GC-M