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文檔簡介
1、研究目的和背景:
鼻咽癌是我國南方地區(qū)常見的頭頸部惡性腫瘤之一,常規(guī)放射治療后,5年生存率約40-70%,治療失敗的主要原因是局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。因此尋找判斷鼻咽癌預(yù)后相關(guān)的分子指標(biāo)有助于早期檢測,指導(dǎo)綜合治療,從而提高生存率和生存質(zhì)量。近年來研究發(fā)現(xiàn)Id1蛋白在乳腺癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、前列腺癌、肝癌、小細(xì)胞肺癌、胃癌、食管癌、鼻咽癌等多種腫瘤中高表達(dá),且與患者預(yù)后密切相關(guān)。
本研究旨在運(yùn)用免疫
2、組織化學(xué)染色技術(shù)和Western blot法,檢測鼻咽癌和鼻咽慢性炎癥組織中Id1的表達(dá)水平,探討其與鼻咽癌分期、臨床相關(guān)因素及預(yù)后之間的關(guān)系。
材料和方法:
1、鼻咽癌石蠟組織標(biāo)本和新鮮組織標(biāo)本
收集中山大學(xué)附屬二院和廣州醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院2000年1月至2004年7月收治的鼻咽癌患者的石蠟組織標(biāo)本88例,其中男性71例、女性17例,年齡24-78歲,平均年齡52.79±11.48歲。鼻咽癌分
3、期采用福州92分期標(biāo)準(zhǔn),病理診斷為低分化鱗癌85例,未分化型3例,全部病例隨訪時間超過5年。取鼻咽慢性炎癥組織20例作為對照組。
收集中山大學(xué)附屬二院鼻咽癌新鮮組織標(biāo)本5例,鼻咽慢性炎癥新鮮組織標(biāo)本2例。
2、主要試劑
兔抗人Id1蛋白多克隆抗體(SC-488 Santa Cruz公司)、GAPDH一抗(BM1623武漢博士德生物工程有限公司)、二步法免疫組化檢測劑兔二抗(PV-6001北京中杉
4、金橋生物技術(shù)有限公司)、DAB顯色液(ZLI-9017北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)、蘇木素(ZLI-9039北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)。
3、實(shí)驗(yàn)方法
采用免疫組織化學(xué)染色二步法和Western blot法檢測鼻咽癌組織和鼻咽慢性炎癥組織中Id1蛋白的表達(dá)水平。
4、統(tǒng)計學(xué)處理
計量資料的數(shù)據(jù)表示為均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差。計數(shù)資料比較采用四格表資料的Fisher's精確概率法檢驗(yàn)或R×
5、C表資料的x2檢驗(yàn)。相關(guān)分析采用Spearmanrank test。生命曲線用Log-Rank檢驗(yàn),應(yīng)用COX模型對生存資料進(jìn)行多因素分析。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件分析。
結(jié)果:
1、88例鼻咽癌組織中Id1陽性73例,表達(dá)率82.95%,20例鼻咽慢性炎癥組織中Id1陽性3例,表達(dá)率15%,兩組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=36.092 P=0.000),結(jié)果顯示Id1在鼻咽癌組織中的表達(dá)率明顯高于
6、鼻咽慢性炎癥組織。
2、鼻咽癌組織中Id1表達(dá)與腫瘤T分期、N分期、臨床分期明顯相關(guān)(P<0.05),與年齡、性別無相關(guān)性(P>0.05)。
3、73例鼻咽癌病人(初診無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移)中,存活時間超過5年的有48例(65.75%),其中59例Id1陽性的病人中,存活時間超過5年的有35例(59.32%),14例Id1陰性的病人中,存活時間超過5年的有13例(92.86%),兩組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.026
7、),結(jié)果顯示Id1表達(dá)陽性的鼻咽癌病人預(yù)后差。
4、Id1蛋白的表達(dá)水平與鼻咽癌腫瘤局部和區(qū)域淋巴結(jié)復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和5年無瘤生存無明顯相關(guān)性(P>0.05)。
5、鼻咽癌臨床分期可作為腫瘤預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測因子(P<0.05),Id1蛋白的表達(dá)水平不能作為鼻咽癌預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測因子(P>0.05)。
6、Id1蛋白在2例鼻咽慢性炎癥組織中的表達(dá)水平低于在5例鼻咽癌組織中的表達(dá)水平(P=0.021)。<
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