腺苷停搏液對未成熟心肌保護作用的實驗研究.pdf

1、目的： 心肌缺血再灌注損傷是臨床實踐中常見的組織損傷，其準確機制尚未完全闡明。研究結(jié)果顯示細胞凋亡的發(fā)生，是缺血性再灌注損傷的重要環(huán)節(jié)之一。腺苷(Adenosine)是一種嘌呤核苷，由糖苷鍵連接腺嘌呤和核糖而成。它是腺苷酸的前體，又是其代謝產(chǎn)物，廣泛分布于體內(nèi)各種組織中，具有減慢心律，擴張血管，抑制中性粒細胞活化及炎性介質(zhì)的釋放，減輕鈣超等多種作用。本實驗采用Langendorff離體心臟工作模型，排除了神經(jīng)體液及外周血管阻力等

2、因素對藥物作用的影響，觀察腺苷停搏液對心肌缺血再灌注損傷是否具有保護作用，并探討其保護作用的可能機制。 材料與方法： 采用出生21±2天的健康日本大耳白幼兔20只，雌雄不拘。隨機分為對照組與腺苷組，每組10只。幼兔腹腔注射10％烏拉坦麻醉，耳緣靜脈注射肝素鈉500U抗凝。開胸并迅速取出心臟，立即浸入4℃K—H液中，經(jīng)主動脈插管以后連接于自制Langendorff離體心臟灌注裝置上，以37℃K—H液灌注，灌注壓恒定為60m

3、mHg。經(jīng)過15分鐘的自然灌流平衡后，對照組灌注4℃ST、ThomasⅡ停搏液，腺苷組給予灌注4℃ ST．、ThomasⅡ停搏液加腺苷2mmol/L停搏。停搏兩組心臟經(jīng)低溫(4℃)缺血30min后，以37℃K—H液再灌注至復跳后90min。實驗結(jié)束后留取部分左心室心肌分別放入10％的甲醛溶液中固定48小時后脫水，蠟塊包埋。部分左室心肌用3.5％戊二醛溶液固定，分別計量缺血前、缺血再灌注后30分鐘、缺血再灌注60分鐘、缺血再灌注90分鐘時

4、點的冠脈流量(CF)，并留取缺血再灌注后各時間點流出液2ml，用全自動生化檢測儀檢測其肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)的含量；用TUNEL法標記凋亡心肌細胞并計算凋亡指數(shù)(AI)，于電子顯微鏡下觀察心肌超微結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果： 1、CF的變化：與對照組相比，腺苷停搏液組缺血再灌注后各個時間點冠脈流量增加(P<0.05)。 2、CK，LDH的變化：與對照組相比，腺苷停搏液組缺血再灌注后各時間點的肌酸激酶(CK

5、)，乳酸脫氫酶(LDH)漏出量減少(P<0.05)。 3、心肌凋亡指數(shù)(AI)的變化：與對照組相比，腺苷停搏液組心肌凋亡指數(shù)(AI)減小(P<0.05)。 4、心肌超微結(jié)構(gòu)的改變：與對照組相比，腺苷停搏液組的心肌超微結(jié)構(gòu)改變明顯減輕。 結(jié)論： 腺苷停搏液能夠增加缺血再灌注心臟的冠脈流量，減輕缺血再灌注心肌細胞心肌酶漏出，減輕缺血再灌注對心肌細胞超微結(jié)構(gòu)的損傷。減少心肌細胞凋亡從而起到對未成熟心肌的保護作用