國人眼白化病1型基因型與表型特征研究.pdf

1、1.研究背景 眼白化病1型(ocular albinism type 1，OA1)足一種單基因遺傳病，以X連鎖隱性的方式進行遺傳，也被稱為Netteship-Fall型眼白化病或者X連鎖眼白化病(XL,OA)，它足眼白化病中最常見的類型?；颊叨紴槟行裕追N人患者主要表現(xiàn)為先天性眼球震顫、視力低下、虹膜和眼底的色素沉著不足、中心凹發(fā)育不良等，屈光不正、斜視、畏光、雙眼功能障礙也很常見，患者的皮膚、毛發(fā)顏色一般正常。女性一般不發(fā)病，

2、但可以足攜帶者，臨床上無任何癥狀，但檢查可有虹膜半透明、眼底色素分布不均的體征。黑種人的患者同樣具備先天性眼球震顫、視力低下及黃斑發(fā)育不良的表現(xiàn)，但虹膜及眼底色素沉著不足非常不明顯，所以患者只表現(xiàn)為輕度的虹膜半透光，且很難看到白化病眼底的表現(xiàn)。而在亞洲人群中，目前還缺少關(guān)于該病的分子牛物學(xué)研究及臨床特征的描述。 GPR143基因突變是已知的眼白化病1型的唯一病因，定位于Xp22.3，共長40kb，含有9個外顯子。GPR143編碼

3、的OA1蛋白被認為是G偶聯(lián)蛋白受體家族的一員，它主要表達在虹膜、視網(wǎng)膜色素上皮及皮膚的黑色素細胞中，定位于黑色素小體和溶酶體的膜上，和G偶聯(lián)蛋白受體一樣，發(fā)揮著信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用，其功能是調(diào)節(jié)黑色素小體的牛長。GPR143基因突變可導(dǎo)致OA1蛋白的功能障礙，從而引起黑色素小體生長失控，誘發(fā)病變。GPR143基因突變在很多國家的白種人群及黑種人群中都有過報道，如新西蘭、英國、美國、德國、加拿大、比利時、法國、意大利、南非等，但在亞洲人群中關(guān)于

4、此病的分子生物學(xué)研究幾乎空白。 2.研究目的 目前在亞洲人群中缺少眼白化病l型的分子生物學(xué)研究及臨床描述，本研究主要篩查中國人眼白化病1型致病基因的突變類型及特點，并了解中國人眼白化病1型基因型與表型的關(guān)系。 3.實驗方法 收集選取6個眼白化病1型的家系，征得患者及其家系成員的同意后抽血制備基因組DNA，并收集相關(guān)臨床資料。用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)對致病基因GPR143的編碼區(qū)及其臨接內(nèi)含子進行擴增后，直

5、接測序分析GPR143基因。另外，用異源雙鏈一單鏈構(gòu)象多態(tài)性(HA-SSCP)的方法對患者及其家系成員及100例正常對照進行驗證。 4.實驗結(jié)果 在這6個家系中分別發(fā)現(xiàn)了6種不同的突變，分別為c.238_240delCTC(p．Leu80del)、c．353G＞A(p．Gly118Glu)、c．658+1G＞A、c．849delT(p．Val284Serfs×15)，g．1103_7266del6164，g．25985_

6、26546del562。在這6個突變中，5個為新突變，c．353G＞A(p．Gly118Glu)足一個已知突變。PCR HA-SSCP結(jié)果顯示100例男性正常對照中未發(fā)現(xiàn)這6種突變。6種突變理論上會導(dǎo)致GPR143基因編碼的OA1蛋白功能喪失，不能正常調(diào)控黑色素小體的牛長，從而引起疾病。 國人眼白化病1型的臨床特點與白種人有著明顯的差別，國人OA1患者缺乏典型的虹膜色素沉著不足及白化病眼底的表現(xiàn)，大部分僅有非常輕度的虹膜和眼底色