非綜合征型白化病家系基因分析及產(chǎn)前基因診斷的研究.pdf

1、目的：①了解中國(guó)人群非綜合征型白化病致病基因的主要基因類型、突變方式和突變位點(diǎn)的分布特征，探討白化病的臨床表型與基因類型的相關(guān)性，建立適合我國(guó)白化病患者的基因診斷方法和產(chǎn)前基因診斷方法。②探討胎兒鏡和基因檢測(cè)兩種產(chǎn)前診斷方法在臨床上的應(yīng)用價(jià)值，建立適合我國(guó)白化病人群的產(chǎn)前診斷方法。 方法：①收集26個(gè)無(wú)血緣關(guān)系白化病家系DNA標(biāo)本共84份(其中2個(gè)家系僅收集到親代DNA標(biāo)本)，包括夫婦雙方和(或)先證者外周血DNA標(biāo)本64份、胎

2、兒羊水細(xì)胞DNA標(biāo)本19份、絨毛DNA標(biāo)本1份。通過(guò)先證者的I臨床表型將26個(gè)家系初分為OCA1A型19個(gè)，OCA2型7個(gè)。針對(duì)可能的基因類型進(jìn)行家系各成員DNA標(biāo)本PCR-SSCP檢測(cè)，結(jié)合直接測(cè)序法檢測(cè)家系OCA1、OCA2、OCA3和OCA4四種非綜合征型白化病突變基因。分析其中25個(gè)家系白化病突變基因與臨床表型的相關(guān)性。分析其中23個(gè)家系親代與子代突變基因的遺傳方式及產(chǎn)前基因診斷的可行性。②對(duì)要求胎兒鏡檢查的家系中的14個(gè)隨訪至

3、妊娠結(jié)局，以胎兒或新生兒表型是否正常為診斷金標(biāo)準(zhǔn)，比較胎兒鏡與產(chǎn)前基因檢測(cè)兩種診斷方法的優(yōu)缺點(diǎn)。 結(jié)果：①26個(gè)家系52個(gè)預(yù)期致病等位基因中，47個(gè)等位基因檢出致病性突變或新突變，突變的檢出率為90％(47/52)。其中25個(gè)家系被分別確診為19個(gè)OCA1，4個(gè)OCA4，2個(gè)OCA2。另外1個(gè)家系四種OCA基因類型均未檢測(cè)到突變。19個(gè)OCA1共檢測(cè)到23種突變，15種是已報(bào)道的致病性突變，8種是可疑新突變(C100P，C100

4、T,R212T,T235G,R299C，G506L，1348insGG,IVS2-17insAC)，有待進(jìn)一步確認(rèn)；錯(cuò)義突變(15/23)是主要的突變方式；插入突變P930insC(7/38)和錯(cuò)義突變R299H(6/38)出現(xiàn)頻率較高。4個(gè)OCA4檢測(cè)到6種突變，5種是可疑新突變(G110A，L151S，A160G，Y266X，1-6delgtggccatgg)，其中錯(cuò)義突變4種，無(wú)義突變1種，缺失突變1種。2個(gè)OCA2檢測(cè)到3種錯(cuò)義

5、突變，均為可疑新突變(T450L，A455G,L727P)。臨床上初分為OCA1A白化病患者，其表型與基因類型的符合率為84％；初分為OCA2患者，其表型與基因類型的符合率僅為29％；OCA1B、OCA2、OCA4三種基因型的臨床表型間相互交叉。通過(guò)家系分析表明，22個(gè)家系44個(gè)突變等位基因均以隱性遺傳的方式傳給子代，符合孟德?tīng)栠z傳規(guī)律。1個(gè)家系胎兒攜帶突變基因與雜合子父親一致，沒(méi)有攜帶母方的白化病基因，但生后表型為“白化病兒”，與隱性

6、遺傳規(guī)律似不相符，其原因有待進(jìn)一步探討。②14個(gè)家系中胎兒鏡檢查的診斷符合率92％，產(chǎn)前基因檢測(cè)的診斷符合率為100％，產(chǎn)前基因診斷的準(zhǔn)確性更高。 結(jié)論：①26個(gè)白化病家系突變基因分析結(jié)果提示，OCA1可能是我國(guó)主要的基因類型，其中插入突變P930insC和錯(cuò)義突變R299H可能是中國(guó)人群的主要突變方式。PCR-SSCP結(jié)合直接測(cè)序法可以檢測(cè)出90％以上的基因突變，是適合我國(guó)白化病患者的基因診斷方法。②在分析家系白化病突變基因的