版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、背景和目的:
酒精性股骨頭壞死(Osteonecrosis of the femoral head,ONFH)在臨床上常見(jiàn),早期癥狀隱匿,容易被忽視,當(dāng)髖部疼痛不適就診時(shí),股骨頭病變往往發(fā)展為ARCOⅡ期或Ⅱ期以上,失去了治療的最佳時(shí)期,該病致殘率高,嚴(yán)重威脅著人類(lèi)的健康,迄今沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有效預(yù)防該病發(fā)生的方法。最新的酒精性股骨頭壞死發(fā)病機(jī)理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,過(guò)氧化物酶體增殖子活化受體-γ(PPARγ)基因在動(dòng)物股骨頭內(nèi)的多潛能干
2、細(xì)胞骨髓基質(zhì)細(xì)胞(marrow stromal cells,MSCs)成脂分化過(guò)程中起著關(guān)鍵性的調(diào)節(jié)作用,長(zhǎng)期大量的酒精攝入可明顯上調(diào)PPARγ基因表達(dá),促進(jìn)MSCs成脂分化,抑制其成骨分化,引起股骨頭內(nèi)脂肪細(xì)胞數(shù)目增多、體積增大、脂質(zhì)沉積、骨細(xì)胞變性壞死。本研究運(yùn)用RNA干擾(RNA interference,RNAi)原理,將經(jīng)過(guò)篩選、鑒定并體外擴(kuò)增的高效siRNA腺病毒載體注入家兔的股骨頭內(nèi),觀(guān)察siRNA腺病毒預(yù)防酒精性O(shè)NFH
3、的效果,從基因方面尋求一種防治酒精性股骨頭壞死的有效途徑。
材料和方法:
選取健康新西蘭種家兔96只,2~3月齡,體重2.7±0.5/只,雌雄不拘,隨機(jī)分為4組,每組24只。正常對(duì)照組(N組):采用灌胃法,給予10%葡萄糖注射液10ml/(kg·d);酒精組(M組):采用灌胃法,給予白酒(酒精度含量46%V/V)10ml/(kg·d),作為股骨頭壞死模型組;酒精+重組腺病毒組(S組):同法同量灌酒,在實(shí)驗(yàn)第1
4、、3、5月的第1天隨機(jī)選擇側(cè)別麻醉下經(jīng)股骨頸行股骨頭穿刺,注入25μl siRNA腺病毒滴液,用骨蠟封閉穿刺小孔。酒精+穿刺組(CO組):手術(shù)方法同S組,但不注入siRNA腺病毒載體。各組動(dòng)物分別于實(shí)驗(yàn)第2、4、6月月末測(cè)定空腹血清總膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)含量;觀(guān)察各組動(dòng)物股骨頭組織學(xué)變化;測(cè)定各組股骨頭組織中的最大脂肪細(xì)胞平均直徑、骨小梁面積分?jǐn)?shù)和空骨陷窩計(jì)數(shù)。采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)各組股骨頭組織中PPARγmRNA和O
5、steocalcin mRNA的表達(dá)。Western-blot檢測(cè)各組股骨頭內(nèi)PPARγ蛋白表達(dá)。
結(jié)果:
1.一般狀況:在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間,N組食欲正常,動(dòng)作敏捷,體重逐漸增加;M、CO兩組隨酒精灌胃時(shí)間延長(zhǎng)食欲逐漸下降,活動(dòng)量減小,動(dòng)作遲緩,體重增長(zhǎng)不明顯,精神欠佳,皮毛發(fā)黃、晦澀、失去光澤;S組精神、食欲、體重增長(zhǎng)及動(dòng)作靈活性?xún)?yōu)于M、CO組,但較N組稍差。
2.各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各時(shí)間段空腹血清甘油
6、三酯(TG)和總膽固醇(CHO)含量變化(mmol/L):實(shí)驗(yàn)第2、4、6個(gè)月M、CO、S組動(dòng)物空腹TG、CHO測(cè)定結(jié)果明顯高于N組水平,且隨實(shí)驗(yàn)進(jìn)展呈逐漸增高趨勢(shì),與N組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);股骨頭組織病理學(xué)HE染色、蘇丹Ⅲ脂肪染色顯示M、CO組股骨頭內(nèi)空骨陷窩計(jì)數(shù)、脂肪細(xì)胞及最大脂肪細(xì)胞平均直徑明顯增多、增大,骨小梁稀疏、變細(xì),相對(duì)N、S組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),S組空骨陷窩計(jì)數(shù)、脂肪細(xì)胞及最大脂肪細(xì)胞平均
7、直徑未見(jiàn)明顯增加(P>0.05),相對(duì)N組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3.股骨頭骨髓細(xì)胞成脂、成骨分化基因檢測(cè)結(jié)果:RT-PCR檢測(cè)股骨頭骨髓細(xì)胞中PPARγmRNA和Osteocalcin mRNA基因表達(dá)、Western-blot檢測(cè)股骨頭骨髓細(xì)胞PPARγ蛋白表達(dá)結(jié)果顯示M、CO組股骨頭內(nèi)PPARγmRNA基因、PPARγmRNA蛋白相對(duì)β-actin的吸光度比值明顯增高,Osteocalcin mRNA基因相對(duì)β-acti
8、n的吸光度比值明顯降低,與N、S組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),S組中PPARγmRNA基因、PPARγmRNA蛋白相對(duì)β-actin的吸光度比值和Osteocalcin mRNA基因相對(duì)β-actin的吸光度比值相對(duì)N組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:
1.長(zhǎng)期大量的酒精攝入可以導(dǎo)致酒精性股骨頭缺血壞死。
2.pAdeno-X-siPPARγ重組腺病毒能夠有效阻斷PPARγ m
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 葛根素預(yù)防酒精性股骨頭壞死的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 短期制作酒精性股骨頭壞死動(dòng)物模型的探索.pdf
- 酒精性股骨頭壞死的發(fā)病機(jī)理及相關(guān)研究.pdf
- 聯(lián)合調(diào)控PPARγ及CGRP基因表達(dá)預(yù)防酒精性股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 普伐他汀鈉對(duì)兔酒精性股骨頭壞死干預(yù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 股骨頭壞死
- 鮭魚(yú)降鈣素預(yù)防股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf
- 股骨頭壞死研究
- 三七總皂苷對(duì)酒精性股骨頭壞死血脂的影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 晚期酒精性股骨頭壞死骨組織中相關(guān)基因的表達(dá).pdf
- 早期介入預(yù)防創(chuàng)傷性股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 股骨頭壞死愈膠囊對(duì)兔激素性股骨頭壞死VEGF表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 激素性和酒精性股骨頭壞死組織形態(tài)學(xué)的比較研究.pdf
- NO、ET在酒精性股骨頭壞死過(guò)程中含量變化的實(shí)驗(yàn)研究及意義.pdf
- 股骨頭壞死愈膠囊對(duì)兔激素性股骨頭壞死微循環(huán)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 股骨頭骨缺損范圍與股骨頭壞死塌陷預(yù)測(cè)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 新型股骨頭偏心鉆微創(chuàng)治療股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 股骨頭壞死 ppt課件
- 股骨頭壞死疾病查房
- 股骨頭壞死診治原則
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論