MMP-9、TIMP-1、VEGF及增殖與凋亡相關(guān)基因在甲狀腺腫瘤中的表達(dá)及臨床意義研究.pdf

1、本文通過檢測(cè)MMP-9、TIMP-1mRNA及MMP-9、TIMP-1、VEGF、Bcl-2、PCNA蛋白在乳頭狀甲狀腺癌(PTC)、甲狀腺腺瘤(TA)、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫(NG)、癌旁正常甲狀腺組織(NT)中的表達(dá)及其在不同臨床病理特征PTC(年齡、性別、腫瘤大小、臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后指數(shù))中的變化，探討五種因子與甲狀腺癌侵襲轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系，為臨床治療甲狀腺腫瘤、開辟新的抗癌靶點(diǎn)及評(píng)估預(yù)后提供參考依據(jù)。 研究方法：本實(shí)

2、驗(yàn)應(yīng)用原位雜交、免疫組化及流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)方法，其中原位雜交實(shí)驗(yàn)選用液氮冷凍的甲狀腺切除術(shù)標(biāo)本；免疫組織化學(xué)及流式細(xì)胞術(shù)均采用病理石蠟標(biāo)本進(jìn)行。形態(tài)學(xué)結(jié)果經(jīng)Motic高清晰度數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行病理圖像分析，測(cè)算平均光密度(OD)值。全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS10.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，作方差分析，t檢驗(yàn)。標(biāo)本及PTC病例的臨床及病理資料均來源于唐山工人醫(yī)院及唐山市人民醫(yī)院外科和病理科。所有病例術(shù)前均未經(jīng)任何治療。 研究結(jié)果

3、： 1.MMP-9、TIMP-1mRNA及蛋白在不同甲狀腺腫瘤組織中均呈上調(diào)趨勢(shì)，與NT比較三種不同類型腫瘤組織中MMP-9蛋白及其mRNA表達(dá)顯著增高(P＜0.05或P＜0.01)；三種不同類型腫瘤比較，PTC組織中MMP-9蛋白及mRNA表達(dá)最強(qiáng)，明顯高于另外二種，且組間差異顯著(P＜0.05)。與NT比較，不同甲狀腺腫瘤組織中TIMP-1蛋白及其mRNA表達(dá)量顯著增多(P＜0.05或P＜0.01)，而三種不同類型腫瘤間TI

4、MP-1蛋白及mRNA表達(dá)量沒有明顯改變(P＞0.05)。MMP-9蛋白及其mRNA表達(dá)與PTC瘤體大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后指數(shù)呈正性調(diào)節(jié)關(guān)系(P＜0.01或P＜0.05)，即腫瘤直徑≥20mm、臨床分期Ⅲ、Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、預(yù)后指數(shù)≥65分組MMP-9蛋白及mRNA表達(dá)顯著高于直徑＜20mm、臨床分期Ⅰ、Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、預(yù)后指數(shù)＜65分組(P＜0.01或P＜0.05)。而TIMP-1蛋白及mRNA表達(dá)與PTC瘤體大小、臨

5、床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后指數(shù)呈負(fù)性調(diào)節(jié)關(guān)系(P＜0.01或P＜0.05)。 2.VEGF在各種類型甲狀腺組織上均有不同程度的表達(dá)。與NT相比，PTC、NG和TA組織中VEGF蛋白表達(dá)量呈顯著升高的趨勢(shì)(P＜0.05)；PTC、NG和TA組織中VEGF蛋白表達(dá)量沒有明顯差異(P＞0.05)。不同年齡、性別PTC患者癌組織中VEGF蛋白表達(dá)沒有顯著差異(P＞0.05)；與PTC瘤體大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后指數(shù)呈正性調(diào)節(jié)關(guān)系(

6、P＜0.01或P＜0.05)。 3.與NT比較，Bcl-2蛋白含量?jī)H在PTC組織中顯著增多(P＜0.01)；PCNA蛋白含量在PTC和TA組織中均呈增多的趨勢(shì)(P＜0.05或P＜0.01)。與PTC組比較，兩種良性腫瘤組織中Bcl-2和PCNA蛋白含量均顯著減少(P＜0.01)。不同年齡、性別PTC患者癌組織中Bcl-2、PCNA蛋白表達(dá)沒有顯著差異(P＞0.05)；Bcl-2、PCNA蛋白表達(dá)與PTC臨床病理特征(瘤體大小、臨

7、床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后指數(shù))呈正性調(diào)節(jié)關(guān)系(表達(dá)越高，癌惡性度越高、預(yù)后越差)。 研究結(jié)論： 1.MMP-9mRNA及蛋白在NG、TA及PTC中表達(dá)呈上調(diào)的趨勢(shì)；與PTC的臨床病理特征(瘤體大小、分期、是否轉(zhuǎn)移及預(yù)后指數(shù))呈正性調(diào)節(jié)關(guān)系。TIMP-1mRNA及蛋白在PTC中的表達(dá)明顯高于NT，但與NG及TA差異無顯著性；與PTC的臨床病理特征呈負(fù)性調(diào)節(jié)關(guān)系。MM-9/TIMP-1似乎更能作為評(píng)估腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后的理

8、想指標(biāo)。 2.VEGF在PTC中的表達(dá)顯著高于NT，但與NG及TA之間差異無顯著性，與臨床病理特征(瘤體大小、分期、是否轉(zhuǎn)移及預(yù)后指數(shù))呈正性調(diào)節(jié)關(guān)系。表明VEGF不能作為鑒別甲狀腺腫瘤良惡性的標(biāo)志，但與PTC的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，檢測(cè)PTC組織中VEGF表達(dá)，對(duì)篩選具有轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤，更準(zhǔn)確的估測(cè)預(yù)后、指導(dǎo)臨床治療是一項(xiàng)很有意義的輔助指標(biāo)。 3.PCNA、Bcl-2在PTC中的表達(dá)顯著高于NT、NG及TA組織，并與PTC

9、的臨床病理特征(瘤體大小、分期、是否轉(zhuǎn)移及預(yù)后指數(shù))呈正性調(diào)節(jié)關(guān)系(表達(dá)越高，癌惡性度越高、預(yù)后越差)。表明二者與PTC的發(fā)生、侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。選擇性的誘導(dǎo)凋亡可能成為治療惡性腫瘤的策略之一。 4.MMP-9、TIMP-1、VEGF、PCNA、Bcl-2五種因子在乳頭狀甲狀腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的不同環(huán)節(jié)發(fā)揮作用，聯(lián)合檢測(cè)可能對(duì)甲狀腺腫瘤患者的病變性質(zhì)判斷及惡性腫瘤患者的預(yù)后估測(cè)更有價(jià)值。針對(duì)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的不同環(huán)節(jié)進(jìn)行預(yù)防和治療具有可行