肌球蛋白活化T細胞轉(zhuǎn)輸誘導(dǎo)心肌炎癥反應(yīng)和心肌重塑研究.pdf

1、第一部分 肌球蛋白活化T細胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)輸大鼠心肌自身免疫性炎癥反應(yīng) 目的:心肌肌球蛋白是啟動免疫應(yīng)答的自身抗原。心肌梗死后釋放肌球蛋白，機體可以產(chǎn)生針對該蛋白的自身抗體，通過過繼轉(zhuǎn)輸探討心肌肌球蛋白活化T淋巴細胞誘導(dǎo)的心肌炎癥反應(yīng)。 方法:分離、提純大鼠脾臟樹突狀細胞和T淋巴細胞，分為兩組在體外混合培養(yǎng)：活化組加入大鼠心肌肌球蛋白；未活化組不加大鼠心肌肌球蛋白。將活化或未活化的T淋巴細胞分別經(jīng)鼠尾靜脈轉(zhuǎn)輸入同源大鼠體

2、內(nèi)。分別在轉(zhuǎn)輸后3天、1周末、4周末和8周末處死大鼠，觀察心肌的病理改變和超聲心動圖變化。 結(jié)論:心肌肌球蛋白活化的T淋巴細胞介導(dǎo)心肌梗死后心肌自身免疫性炎癥反應(yīng)。 第二部分 肌球蛋白活化T細胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)輸大鼠心肌細胞因子的表達 目的:心肌肌球蛋白是啟動免疫應(yīng)答的自身抗原。心肌梗死后釋放肌球蛋白，機體可以產(chǎn)生針對該蛋白的自身抗體，通過過繼轉(zhuǎn)輸探討心肌肌球蛋白活化T淋巴細胞轉(zhuǎn)輸大鼠心肌組織細胞因子表達。

3、 方法:體外分離同源大鼠T細胞和樹突狀細胞，按是否與大鼠心肌肌球蛋白共培養(yǎng)而分為兩組(活化組和未活化組)。然后將活化的和未活化的T細胞分別經(jīng)鼠尾靜脈過繼轉(zhuǎn)輸給同源大鼠，觀察3天、1周末、4周末和8周末的心肌病理改變和血流動力學(xué)指標(biāo)的變化；分別采用免疫組織化學(xué)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈(RT-PCR)的方法檢測心肌組織白細胞介素(IL)-1β、IL-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α及IL-10蛋白和mRNA的表達。 結(jié)論:肌球蛋白活化的T細胞

4、介導(dǎo)心肌梗死后炎癥反應(yīng)，同時也促使心肌細胞致炎因子表達，共同導(dǎo)致AMI后心肌細胞的損傷。 第三部分 肌球蛋白活化T細胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)輸大鼠心肌重塑相關(guān)基因的表達 目的:心肌肌球蛋白是啟動免疫應(yīng)答的自身抗原。心肌梗死后釋放肌球蛋白，機體可以產(chǎn)生針對該蛋白的自身抗體，通過過繼轉(zhuǎn)輸探討心肌肌球蛋白活化T淋巴細胞轉(zhuǎn)輸大鼠心肌重塑相關(guān)基因的表達。 方法:體外分離、提純同源大鼠脾臟樹突狀細胞和T淋巴細胞，分為兩組在體外混合培

5、養(yǎng)：活化組加入大鼠心肌肌球蛋白；未活化組不加大鼠心肌肌球蛋白。將活化或未活化的T淋巴細胞分別經(jīng)鼠尾靜脈轉(zhuǎn)輸入健康同源大鼠體內(nèi)。分別在轉(zhuǎn)輸后3天、1周末、4周末和8周末處死大鼠，觀察心肌的病理改變，通過TUNEL法檢測大鼠心肌細胞凋亡；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈(RT-PCR)的方法檢測心肌組織胚胎基因(α、β-MHC)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2及其抑制劑(TIMP-2)mRNA的表達。 結(jié)論:肌球蛋白活化的T淋巴細胞介導(dǎo)心肌重塑相關(guān)基因