法舒地爾抑制心肌炎癥和凋亡改善間歇低氧誘導心肌重構的研究.pdf

1、目的：慢性間歇低氧作為阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征的核心病理生理機制，在其相關的心血管疾病包括心肌重構的發(fā)生發(fā)展過程中起關鍵作用。RhoA/Rho激酶（ROCK）信號轉導通路可參與多種動物模型誘導的心肌重構，但其在慢性間歇低氧所致心肌重構的病理生理過程中是否發(fā)揮作用，尚未見相關研究。本實驗的目的是探究RhoA/ROCK信號通路是否參與慢性間歇低氧誘導的大鼠心肌重構，同時用藥物法舒地爾（F），一種特異性ROCK抑制劑進行干預，從而對RhoA/

2、ROCK信號通路參與慢性間歇低氧誘導大鼠心肌重構的可能機制進行初步探討。
　　方法：雄性SD大鼠（180-200g）隨機分為4組，每組8只：常氧對照組、常氧對照+F組、慢性間歇低氧組、慢性間歇低氧+F組，造模時間6周。測大鼠心臟重量與大鼠體重并計算其比值計算心肌肥大指數(shù)，蘇木精-伊紅（HE）染色法評估大鼠心肌肥大情況并計算心肌細胞平均直徑，馬森三色（Masson）染色法評估心肌細胞間質纖維化情況，TUNEL法檢測心肌組織細胞凋亡情

3、況；透射電鏡觀察各組大鼠心肌超微結構。實時熒光定量 PCR檢測炎癥相關基因IL-6、TNF-α、MCP-1、TGF-β1及NF-κB p65mRNA表達水平，Western Blot檢測大鼠心肌組織細胞中RhoA/ROCK信號通路相關蛋白RhoA、MYPT-1、p-MYPT-1（Thr853），凋亡相關蛋白Bax、Cleaved-caspase3及胞漿和胞核內NF-κB p65的蛋白表達。
　　結果：與常氧對照組相比，慢性間歇低氧

4、組心肌肥大指數(shù)增加（P<0.01），心肌組織中平均心肌細胞直徑增加（P<0.01），心肌纖維化程度增加（P<0.01），心肌細胞凋亡指數(shù)增加（P<0.01）；與此同時，炎癥因子IL-6、TNF-α、MCP-1、TGF-β1mRNA表達水平升高（P<0.01），RhoA/ROCK信號通路相關蛋白RhoA、MYPT-1、p-MYPT-1（Thr853），凋亡相關蛋白 Bax、Cleaved-caspase3的蛋白表達水平明顯增高（P<0.0

5、1）；NF-κB p65胞漿蛋白水平降低、胞核水平升高（P<0.01）。法舒地爾藥物干預6周后，慢性間歇低氧+F組大鼠的心肌肥大指數(shù)、心肌纖維化程度、心肌凋亡程度、RhoA/ROCK通路相關蛋白的表達水平較慢性間歇低氧組明顯下降（P<0.01），NF-κB p65胞漿蛋白水平升高，胞核水平降低（P<0.01）；心肌細胞平均直徑減?。≒<0.05），炎癥細胞因子、NF-κB p65 mRNA表達水平及凋亡相關蛋白表達水平下降（P<0.05