甘藍型黑、黃籽油菜種皮蛋白質差異表達研究.pdf

1、西南農業(yè)大學碩士學位論文甘藍型黑、黃籽油菜種皮蛋白質差異表達研究姓名：萬華方申請學位級別：碩士專業(yè)：植物學指導教師：梁穎20050501劍，沒煮檢測要4極酸性(雄《)或者掇堿性瞧◇llO)爨囊艨。燕站撿測豹蛋囊震遴孬比塒時發(fā)現，鑄個相同發(fā)商時期都有相當數量的蛋白質可以匹配，這表明近簿基因系的甘藍型黃、黑籽鈉菜在相同的發(fā)育時期時，生理代謝有很高的相似性同時，在相同的發(fā)育時期，LI和L2都有備自酶特異簧自點，雖這些特異點在等電點上存在著狠大

2、豹差舅。Ll靜特異煮戔要集串在羧裎范圍，褥L2瓣特羚點列倍寓予堿毪臻。4從Ll、L2各自不同發(fā)育時期種皮蛋白雙向電泳圖譜及相應的點匹配報告可以看出，在發(fā)育過程中，種皮蛋白點的數目是先上升，到開花后32天達最高值，隨后開始下降。發(fā)育過程中相鄰近的兩個發(fā)育時期的蛋白圖譜中都可以有一定數目的蛋白點可以匹配。這些點隨著發(fā)育進程出現表達的上調或者是下調，同時也有部分蛋白點在相鄰的兩個發(fā)育時期的表達相當。種子逐漸發(fā)育成熟時，相鄰兩發(fā)育時期那些可以匹

3、配的點的等電點有向堿性端偏移的趨勢相鄰兩發(fā)育時期的圖譜上，圖譜都有各自的特異點。這些特異點的分布也存在著一個現象：較早的發(fā)育時期的圖譜的特異點偏向于酸性端。發(fā)育期靠后的那個發(fā)育時期圖譜的特異點則偏向于堿性端。5以3對黃籽和黑籽近等基因系為試材。在開花后柏天時，分別取黑籽(L1、L3、L5)和黃籽(L2、L4、L6)種皮蛋白質混合樣進行雙向電泳pH58)。選擇黃籽種皮和黑籽種皮表達量較大的特異蛋白質點各一個，經胰蛋白酶解，應用MALDI=

4、TOFMS方法對其進行裝定，獲得質量肽指紋圖譜。將質譜所測膚質量指紋譜數據輸入網絡應用程序Mascot(http：／／wwwexpasyorR／tools)進行檢索，并將肽質量指紋譜數據與蛋白質數據庫匹配，結合雙向電泳所得的分子量及pI信息，初步鑒定出黃籽種皮特異蛋白質為鈣調磷酸酶(Calcineurin。CN)，其pI值為555，分子量為26012kD。與雙向電泳測定結果差異不大。而黑籽種皮特異蛋白質肽質量指紋譜結果噪音高t效果差，沒