心肌梗死后心肌細(xì)胞增殖的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)大鼠心肌梗死后血流動(dòng)力學(xué)變化,心肌組織與細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變、心肌細(xì)胞凋亡與分裂增殖、細(xì)胞周期進(jìn)程、與細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)以及細(xì)胞端粒與端粒酶活性等方面實(shí)驗(yàn)研究,探討心肌細(xì)胞增殖分化在心肌梗死后心肌重塑中的地位及其可能調(diào)控機(jī)制.方法:應(yīng)用結(jié)扎大鼠左冠狀動(dòng)脈方法制備心肌梗死模型,對(duì)病理狀態(tài)下心肌細(xì)胞的增殖分化進(jìn)行系列實(shí)驗(yàn)研究.實(shí)驗(yàn)第一部分主要觀察大鼠心肌梗死后血流動(dòng)力學(xué)及心肌組織病理形態(tài)改變;第二部分應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)心肌梗死后的心

2、肌細(xì)胞凋亡率進(jìn)行研究;第三部分應(yīng)用熒光免疫法檢測(cè)核分裂指數(shù)及心肌肌動(dòng)蛋白;第四部分應(yīng)用透射電鏡觀察大鼠心肌梗死后超微結(jié)構(gòu)變化;第五部分應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞周期,并應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)大鼠心肌梗死后p27蛋白、Cyclin D2、CDK4的表達(dá);第六部分應(yīng)用southern雜交測(cè)定端粒片段平均長(zhǎng)度,同時(shí)檢測(cè)端粒酶的表達(dá).結(jié)論:1、大鼠心肌梗死后發(fā)生心肌細(xì)胞壞死,心肌細(xì)胞核固縮、肌纖維斷裂以及部分心肌纖維樣變性,同時(shí)心肌收縮功能減

3、弱,左室順應(yīng)性減退及左心室舒張功能異常;2、心肌梗死后1~30日心肌細(xì)胞凋亡率的升高,反映了在心肌梗死發(fā)生后較長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)持續(xù)存在著心肌細(xì)胞的死亡;3、心肌細(xì)胞核分裂指數(shù)及心肌肌動(dòng)蛋白在心肌梗死后的增加提示心肌細(xì)胞更新在心肌組織生命全程都發(fā)生著并處于動(dòng)態(tài)平衡之中,病理狀態(tài)下存在的較高的心肌細(xì)胞核分裂可能在一定時(shí)期內(nèi)與凋亡和壞死介導(dǎo)的心肌細(xì)胞死亡同時(shí)存在,通過(guò)形成新的心肌細(xì)胞參與梗死后心臟的重塑過(guò)程,干預(yù)因細(xì)胞死亡引起的心肌細(xì)胞數(shù)量的減少,維