牛白細(xì)胞粘附缺陷病（BLAD）診斷及白細(xì)胞功能研究.pdf

1、白細(xì)胞粘附缺陷病(Bovineleukocyteadhesiondeficiency，BLAD)是一種常染色體隱性致死性的遺傳性疾病，以嚴(yán)重的重復(fù)性感染、缺少膿液形成、損傷愈合延遲和白細(xì)胞增多癥為特征。其病因與人的白細(xì)胞粘附缺陷病(Leukocyteadhesiondeficiency，LAD)相同，命名牛的白細(xì)胞粘附缺陷病。BLAD是由于編碼整合素β亞單位(CD18)的383位堿基由A突變?yōu)镚所造成的，與之相應(yīng)的128位的天門冬氨酸變

2、成了甘氨酸，致使白細(xì)胞表面的β2整合素表達(dá)明顯減少或缺乏。 為了診斷白細(xì)胞粘附缺陷病，根據(jù)牛白細(xì)胞粘附缺陷病病因，采用RT-PCR(reversetranscriptasePCR)擴(kuò)增含有整合素β亞單位383位堿基的基因片段、再用TaqⅠ酶切PCR產(chǎn)物的檢測(cè)方法，同時(shí)結(jié)合臨床血液學(xué)變化和病史進(jìn)行診斷。確診一頭4歲的荷斯坦母牛為白細(xì)胞粘附缺陷病病牛，2頭3個(gè)月齡的犢牛為白細(xì)胞粘附缺陷病攜帶牛。病牛的白細(xì)胞總數(shù)為82.6×109個(gè)/

3、L，攜帶牛白細(xì)胞總數(shù)為14.7×109個(gè)/L，健康牛白細(xì)胞總數(shù)為23.5×109個(gè)/L，病牛的白細(xì)胞總數(shù)明顯地高于攜帶牛和健康牛。 為了澄清BLAD病牛和攜帶牛的白細(xì)胞功能變化情況，對(duì)白細(xì)胞的趨化反應(yīng)、吞噬酵母菌和金黃色葡萄球菌的能力進(jìn)行了檢測(cè)和分析。結(jié)果BLAD病牛白細(xì)胞的的趨化反應(yīng)比健康牛、攜帶牛明顯降低，而攜帶牛和正常牛相比趨化反應(yīng)僅略有下降；BLAD牛的白細(xì)胞對(duì)酵母菌吞噬能力比健康牛、攜帶牛有顯著降低，吞噬率為10％，攜

4、帶牛的白細(xì)胞對(duì)酵母菌的吞噬能力和健康牛相比沒有明顯變化，攜帶牛白細(xì)胞吞噬率為89％，健康牛白細(xì)胞吞噬率為92％；BLAD牛白細(xì)胞吞噬金黃色葡萄球菌的能力和健康牛、攜帶牛相比沒有明顯的差異。這說(shuō)明在BLAD病牛，與CD11/CD18粘附分子相關(guān)的白細(xì)胞功能顯著降低，而非依賴于CD18的功能卻沒有明顯變化。 此外，為了解白細(xì)胞對(duì)不同金黃色葡萄球菌菌株吞噬能力的差別，試驗(yàn)檢測(cè)了健康牛白細(xì)胞對(duì)23株金黃色葡萄球菌的吞噬能力。結(jié)果白細(xì)胞對(duì)