10264.擬南芥植株衰老相關突變體的篩選與初步分析

1、ScreeningandAnalysisofMutantRelatedtoSenescenceinArabidopsisThalianaADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceByYangjingSupervisor：ProfDon

2、gfacaiDate：May，2014摘要植物衰老是植物生長發(fā)育過程中由多種因素綜合作用引發(fā)的一系列的變化過程，在衰老過程中伴隨著一系列的生理變化。由于衰老相關基因的表達，在植物生理表型上顯示出各種變化特征，在這些變化中最明顯的就是葉綠素含量的變化。由于植株體內葉綠素降解，葉綠素水平下降，葉黃素和胡蘿b素相對含量增高，從而在植物葉片上顯示出由綠變黃這一變化，稱為黃化。這一變化過程往往發(fā)生在衰老的初期階段，而且葉綠素含量的變化與植物衰老之

3、間存在著負相關關系，因此有人認為葉綠素含量的變化可以作為葉片衰老的標志。應用葉綠素熒光成像儀可以比較直觀地觀測到植物葉片的葉綠素含量變化，根據葉綠素熒光動力學參數可以推測葉片光合作用中的變化。本實驗采用葉綠素熒光來作為擬南芥衰老突變體的篩選條件，以TDNA插入突變體種子作為篩選材料，篩選出兩個突變體材料，分別命名為∥J『和向J。經過鑒定，二者都是TDNA插入突變體，并且經過遺傳學分析，結果顯示這兩個突變體都是單基因隱性突變體。^』在整個

4、生長期都有明顯的葉片黃化現象，在葉綠素含量和可溶性蛋白含量等方面與wT有顯著差異。∥』的葉綠素熒光表型與WT有顯著差異，經過TAIL—PCR克隆基因之后，通過序列比對，發(fā)現該突變基因可能與鐵、鈷等二價金屬離子的平衡和跨膜運輸相關，經過分析發(fā)現TDNA插入在它的第一個編碼框的第一個外顯子上，并且TDNA插入方向和基因方向一致。經過對∥』相關生理指標的檢測，發(fā)現突變基因引起了生理指標的變化，通過與野生型相比較，結果顯示該基因可能與衰老相關。