奶牛體外受精技術(shù)的研究.pdf

1、卵母細(xì)胞質(zhì)量和精液質(zhì)量不僅直接影響體外受精后的胚胎發(fā)育和移植效果，而且，對(duì)細(xì)胞核移植、克隆動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究具有重要意義。為了提高牛卵母細(xì)胞體外受精的卵裂率和囊胚發(fā)育率，增加胚胎移植著床率，使奶牛體外生產(chǎn)胚胎更有效的推廣應(yīng)用，本研究對(duì)不同來(lái)源牛卵母細(xì)胞體外受精后的胚胎發(fā)育速度和囊胚的形成，體外受精胚移植等技術(shù)和不同個(gè)體的冷凍精液質(zhì)量對(duì)體外受精后的胚胎發(fā)育質(zhì)量及染色體異常發(fā)生率進(jìn)行了分析和研究。結(jié)果如下： 1. 不同來(lái)源牛卵母細(xì)

2、胞體外受精研究 本研究對(duì)活體采卵和屠宰場(chǎng)廢棄卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞體外受精后的卵裂率、胚胎發(fā)育速度及囊胚形成率進(jìn)行了研究，結(jié)果證明，屠宰場(chǎng)廢棄卵巢所得卵母細(xì)胞體外受精后的卵裂率為63.7％，利用OPU技術(shù)所得卵母細(xì)胞的卵裂率為85％，兩者之間差異顯著（P<0.05）。胚胎發(fā)育速度證明，OPU的胚胎卵裂速度比屠宰場(chǎng)廢棄牛卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞體外受精后的卵裂速度快，OPU卵母細(xì)胞體外受精48h，8-細(xì)胞期的胚胎率為41.2％，囊胚形成率為35.1

3、％，屠宰場(chǎng)卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞體外授精48h后的8-細(xì)胞期胚胎率僅有26％，囊胚形成率15.6％，兩者之間差異顯著（P<0.05）。 2. 不同級(jí)別的卵母細(xì)胞體外受精研究 本研究對(duì)活體采卵不同級(jí)別的卵母細(xì)胞體外受精卵裂及囊胚發(fā)育情況進(jìn)行比較研究。結(jié)果表明，活體采卵A、B級(jí)卵母細(xì)胞優(yōu)于C級(jí)卵母細(xì)胞。 3. 胚胎移植 對(duì)28頭黃牛發(fā)情第7天，移植A、B級(jí)早期囊胚36枚，3個(gè)月未發(fā)生返情的有12頭，妊娠期間3頭黃牛流

4、產(chǎn)，分娩時(shí)難產(chǎn)死亡1頭，存活12頭。 4. 不同個(gè)體的冷凍精液體外受精研究和染色體分析 本研究對(duì)不同個(gè)體的種公牛的冷凍精液體外受精后的卵裂率和囊胚發(fā)育率進(jìn)行了比較研究；同時(shí)，對(duì)體外受精胚的染色體進(jìn)行分析，結(jié)果表明，冷凍精液A體外受精后的卵裂率及囊胚發(fā)育率均高于冷凍精液B，體外受精后的胚胎發(fā)育速度快，在第7天有47.8％的胚胎達(dá)到早期囊胚，說(shuō)明不同個(gè)體的精子活率不同，體外受精后的卵裂率和囊胚形成率不同。兩種冷凍精液體外受精