山羊卵母細(xì)胞體外成熟以及體外受精的研究.pdf

1、本文系統(tǒng)研究了溫度，無(wú)血清培養(yǎng)對(duì)山羊卵母細(xì)胞體外成熟和體外受精的影響，主要結(jié)果如下： 1.實(shí)驗(yàn)比較了切割法和抽吸法從屠宰山羊卵巢表面卵泡采集得到的可用卵母細(xì)胞數(shù).。結(jié)果表明二者之間差異顯著，切割法采集得到的可用卵母細(xì)胞數(shù)顯著高于抽吸法(1.56枚/卵巢vs0.86枚/卵巢)。 2.用切割法采集不同季節(jié)山羊的卵母細(xì)胞，結(jié)果表明不同季節(jié)采集的卵母細(xì)胞數(shù)差異顯著，非繁殖季節(jié)的山羊卵巢可采集到更多的可用卵母細(xì)胞(1.71枚/卵巢

2、vs1.27枚/卵巢)。 3.本實(shí)驗(yàn)分別在38.0℃、39.0℃和40.0'℃的溫度下，對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行體外成熟培養(yǎng)和體外受精，成熟率分別為64.0％、57.7％和58.7％，受精率分別為13.4％、14.7％和12.8％。結(jié)果表明：培養(yǎng)溫度及受精溫度只要在山羊正常體溫及其變動(dòng)范圍內(nèi)，則成熟率及受精率無(wú)顯著差異。 4.將用切割法和抽吸法采集到的可用卵母細(xì)胞在相同條件下進(jìn)行體外成熟培養(yǎng)以及體外受精，成熟率分別為60.1％和5

3、9.1％，二者之間差異不顯著；受精率分別為15.0％和14.4％，二者之間差異也不顯著，說(shuō)明卵母細(xì)胞的采集方法對(duì)山羊卵母細(xì)胞體外成熟以及體外受精率無(wú)顯著影響。 5.將繁殖季節(jié)和非繁殖季節(jié)采集的山羊卵母細(xì)胞分別進(jìn)行體外成熟培養(yǎng)以及體外受精，成熟率分別為56.4％和66.1％，二者之間差異顯著；受精率分別為13.9％和13.5％，二者之間差異不顯著。結(jié)果表明季節(jié)對(duì)山羊卵母細(xì)胞的體外成熟有顯著影響，非繁殖季節(jié)卵母細(xì)胞的成熟率更高，而季

4、節(jié)對(duì)山羊卵母細(xì)胞的體外受精無(wú)顯著影響。 6.在體外成熟培養(yǎng)液中分別添加BSA1mg/ml(Ⅰ)、BSA2mg/ml(Ⅱ)、BSA5mg/ml(Ⅲ)、BSA10mg/ml(Ⅳ)、FBS10％(Ⅴ)，在38℃、5％C02、飽和濕度條件下對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行體外成熟培養(yǎng)，成熟率分別為14.9％、34.1％、9.1％、61.5％和60.9％，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別和Ⅳ、Ⅴ比較，差異均顯著；Ⅳ和Ⅴ之間差異不顯著；成熟后體外受精，受精率分別為15.3％、