豬成熟卵母細(xì)胞激活及其孤雌胚發(fā)育研究.pdf

1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬成熟卵母細(xì)胞激活及其孤雌胚發(fā)育研究姓名：劉貞偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：李躍民20050501以獲得較好的激活率和孤雌胚發(fā)育率。離子霉素對(duì)豬卵母細(xì)胞激活及其孤雌胚發(fā)育的影響：將IVM培養(yǎng)44~48小時(shí)豬卵母細(xì)胞移入含不同濃度(15pmolL。。，20Mmol一，25_unolL1)離子霉素的NCSU23中，作片|不同時(shí)間(20min，30mil3，40min’50min)激活卵母細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2、表明：用濃度為15pmolI。1，20pmol一25；_lmolL‘的離子霉素分別作用卵母細(xì)胞40min，卵母細(xì)胞的激活率和卵裂率之間的著異都不顯著(p005)，濃度為20pIIlolL‘的離子霉索組激活率和卵裂率略高。卵母細(xì)胞在含20p_molL1的離子霉素中，作用20min30min，40min50min卵母細(xì)胞的激活率和卵裂率之間的差異不顯著(P005)，作用40mirl組激活率和卵裂率略高。以上結(jié)果說(shuō)明：雖然用濃度為20岬olL

3、‘的離子霉素作用40min，對(duì)豬卵母細(xì)胞的激活率和孤雌胚發(fā)育率最高，但與其他試驗(yàn)組之間無(wú)顯著差異，可見(jiàn)離子毒素在15～25uJllolL‘濃度范圍內(nèi)作用20～50min對(duì)豬卵母細(xì)胞的激活率和孤雌胚發(fā)育率影響不顯著。6DMAP和cB與電激活和離子霉素聯(lián)合作用對(duì)豬卵母細(xì)胞激活及其孤雌胚發(fā)育的影響：將IVM培養(yǎng)44“8小時(shí)的卵母細(xì)胞，先分別在不同的電刺激條件(10KVcm～，120ps，1次脈沖；13KVcm1，80tis1次脈沖；15KVc

4、m一，40ps，1次脈沖)和不同的離子霉素作用條件(151molL_I。50min；20lmolL1，40min；251molL～，30min)刺激后，一組放入含6DllAP和CB的NCSU23中作用4小時(shí)，然后放入NCSU234mgml“BSA的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)另一組則直接放入NCSU234mgml1BSA的培養(yǎng)液中培養(yǎng)。結(jié)果顯示：當(dāng)不同的電刺激條件和不同的離子霉素作用條件分別與61)MAP和cB聯(lián)合使用時(shí)激活率和孤雌胚發(fā)育率顯著提高(

5、P005)。B處理組卵母細(xì)胞的激活率和卵裂率分別為8125％和8325％，極顯著高于C處理組(P(001)。D處理組卵母細(xì)胞的激活率為8688％(139／160)，與B處理組之間無(wú)明顯差異(”005)，卵裂率為8921％(124／139)，與B處理組之間差異顯著(P005)。說(shuō)明豬卵母細(xì)胞的電激活優(yōu)于離子霉素激活。電激活與離子霉素和6DMAPCB聯(lián)合作用，更能提高豬孤雌胚的發(fā)育率。綜上所述：在本實(shí)驗(yàn)室條件下，采用寧波新芝公司CRY一3型