卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)的研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文縮略語(yǔ)表ConfocalscanninglasermicroscopyCSLM共聚焦顯微鏡CorticalgranuleCG皮質(zhì)顆粒EpidermalgrowthfactorEGF表皮生長(zhǎng)因子EstradiolE:雌二醇FetalcalfserumFCS胎牛血清FolliclestimulatinghormoneFSH卵泡刺激素FolliclestimulatinghormonereceptorFSHR卵泡刺激素

2、受體GerminalvesicleGV生發(fā)泡GerminalvesiclebreakdownGVBD生發(fā)泡破裂GonadotrophinreleasinghormoneGnRH促性腺激素釋放激素GonadotrophinreleasinghormoneagonistsGnRHa促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑HumanchorionicgonadotrophinHCG尿絨毛膜促性腺激素Humantuba)fluidmediumHTFHTF培養(yǎng)基

3、InsulinlikegrowthfactorIIGFI胰島素樣生長(zhǎng)因子IIntracytoplasmicsperminjectionICS1卵漿內(nèi)單精子注射技術(shù)invitrofertilizationIVF體外受精invitromaturationIVM卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)技術(shù)LuteinizinghormoneLH黃體生成素OocytecumuluscomplexOCC卵母細(xì)胞一卵丘細(xì)胞復(fù)合物Oocytematurationinhi

4、bitiorOMI卵母細(xì)胞成熟抑制因子OvarianhyperstimulationsyndromeOHSS卵巢過(guò)度刺激綜合征PolycysticovariansyndromePCOS多囊卵巢綜合征ProgesteroneP孕酮TestosteroneT肇酮天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文皮質(zhì)顆粒(corticalgranuleCG)是大多數(shù)哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞所特有的一種細(xì)胞器，在卵母細(xì)胞的成熟過(guò)程中出現(xiàn)特征性的位置遷移，皮質(zhì)顆粒向胞膜下遷移，沿

5、卵膜下呈線(xiàn)狀排列，這是目前公認(rèn)的哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞成熟最后階段的一個(gè)共同特征。卵母細(xì)胞在成熟和受精過(guò)程中，細(xì)胞骨架發(fā)生一系列明顯的變化，微管是一種重要的細(xì)胞骨架成分，對(duì)于哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞減數(shù)分裂的完成、精子的運(yùn)動(dòng)、雌雄原核的結(jié)合是必不可少的。在卵母細(xì)胞體外成熟過(guò)程中，皮質(zhì)顆粒和微管是否發(fā)生與細(xì)胞核成熟同步的變化，關(guān)系到卵母細(xì)胞成熟后受精及卵裂的能力。目前研究體外成熟卵的皮質(zhì)顆粒和微”變化的文獻(xiàn)所見(jiàn)不多。廠(chǎng)本研究分為兩部分，第一部分主要在卵

6、巢顆粒細(xì)胞原代培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，研究顆粒細(xì)胞的分泌功能以及FSH.GnRHa對(duì)分泌功能的影響，其中顆粒細(xì)胞的純度鑒定、顆粒細(xì)ha分泌IGF1和EGF以及GnRHa對(duì)顆粒細(xì)胞功能影響的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。第二部分研究顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)液等對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟以及進(jìn)一步發(fā)育潛能的影響，其中在WM培養(yǎng)體系中加入顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)液尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。研究目的:1.研究成熟卵泡內(nèi)的微環(huán)境2.研究卵巢顆粒細(xì)胞的功能和調(diào)控3.研究卵巢顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)液、表皮生長(zhǎng)因子(epide

7、rmalgrowthfactorEGF)和胰島素樣生長(zhǎng)因子I(insulinlikegrowthfactorI，IGF1)對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟和發(fā)育潛能的影響4.以皮質(zhì)顆粒和微管的特征性分布研究不同的培養(yǎng)體系和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)卵母細(xì)胞核漿成熟協(xié)調(diào)性的影響。研究方法:1.利用放免法檢測(cè)13例接受體外受精患者卵泡液的雌二醇(EstradiolE2)、孕酮(ProgesteroneP)和辜酮(TestosteroneT)的水平，利用免放法檢測(cè)IGF1