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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文西瓜高效植株再生體系建立及四倍體離體誘導(dǎo)研究姓名:張全美申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師:張明方20040601中文摘要阿瓜(CitrullusvulgarisSchrad)是世界重要的經(jīng)濟(jì)作物之一,也是t廿=界十人水果之一,在人們?nèi)粘I钪衦圩有重要的地位。西瓜的抗病和品質(zhì)育種已日益引起育種:L:作者的重視。普通二倍體西瓜離體培養(yǎng)植株高效再生是基因轉(zhuǎn)移、四倍體離體誘導(dǎo)的前提條Pf:(Choi等,1994:Co
2、mpton等,1996)。因此,建立高效的植株再生體系是成功獲得轉(zhuǎn)基田或倍性變異植株的關(guān)鍵。硒瓜基岡型、外植體類型、不同激素組合、苗齡等都會(huì)對(duì)再生頻率產(chǎn)生影響(許智宏等1979;Blackman等,1982;Compton等,1993a)。本試驗(yàn)首先以“京欣1號(hào)”母本和“伊選”出瓜4d占齡子葉為外植體,研究離體培養(yǎng)植株高教再生體系。結(jié)果表明:“伊選”幾卜遠(yuǎn)軸端外植體的植株再生頻率僅為1%,而子nt近軸端外幢體在5mg/LBAOjm∥LI
3、AA的激素組合F植株再生頻率高達(dá)100%,平均每個(gè)外植體的叢生芽數(shù)住所有紙臺(tái)中最多,為103個(gè);“京欣1號(hào)”母本子葉近軸端外植體在2mg/LBAo5mg/L|AA激素鰣合r植株再生頻率為100%平均每個(gè)外植體的叢生芽數(shù)在所有激素組合中最多,達(dá)69個(gè)。本試驗(yàn)條1,|=r,子葉近軸端外植體接種4d即分化出不定芽,至再生茸的移栽僅需40d不定芽在MSO1mg/LNAA的生根培養(yǎng)基上的生根率為973%,移栽成活率達(dá)985%。莊建立了_lT品質(zhì)優(yōu)
4、良的肖瓜品種“京欣l號(hào)”母本平II“伊選”遺傳轉(zhuǎn)化年多倍體育種的高效再生體系后本試驗(yàn)以“京欣l號(hào)”母本為材料,利用誘變荊秋水仙堿、除草卉ij歇拉靈等處理曲瓜子葉,分別進(jìn)行不同濃度、不同處理時(shí)間、處理方式及預(yù)培養(yǎng)試驗(yàn)對(duì)四倍體離體誘導(dǎo)的影響。秋水仙堿誘導(dǎo)四倍體的結(jié)果表明:液體處理方式誘導(dǎo)四倍體的效率優(yōu)Tt4催處理方式,當(dāng)朋200mg/L秋水仙堿處理子葉12h時(shí),最高的植株再生率、存活率羊四倍體率分別為100%、84J3%和571%。而同濃度
5、同時(shí)間處理的周體處理方式中,最高的植抹再生率、存活率和四倍體率分j;l為73,3%、786%和556%。在秋水仙堿處理子n1之前,先:降它們放在不含秋水仙堿的培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間,以提高外植體抗毒害的能力,結(jié)果表:j|j頹培養(yǎng)5d效果最好,存活率年|l四倍體率分別達(dá)952%NI667%。州除草劑歐拉靈誘導(dǎo)四涪體的結(jié)果表明:04mg/l濃度的液體處理方法獲得了856%的四倍體誘導(dǎo)率,高r同濃度的闊體處理方式,其四倍體誘導(dǎo)率為672%,但是
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