頭花蓼(Polygonum capitatum)再生體系建立及四倍體誘導(dǎo).pdf

1、頭花蓼(Polygonum capitatum Buch.-Ham.ex D.Don)為蓼科(Polygonacea)蓼屬(Polygonum)多年生草本植物。我國許多省市都廣為分布，喜歡生長在溫濕、少光照的地方，具有抗旱、耐寒等特點。頭花蓼應(yīng)用歷史悠久，為貴州苗族用藥，其化學(xué)成分豐富，含有黃酮類、酚酸類、有機酸等化合物;民間常用于治療泌尿系統(tǒng)感染、風(fēng)濕痛。通過建立頭花蓼繁殖體系，快速獲得大量生長整齊的幼苗，推動其規(guī)模化生產(chǎn)的需要;并通

2、過植物組織培養(yǎng)與離體誘導(dǎo)技術(shù)相結(jié)合獲得多倍體，進(jìn)而培育出植株粗大、生長旺盛、抗逆性強、有效成分合成速率增加等優(yōu)良品質(zhì)的新品種。
　　本試驗研究了消毒方法、培養(yǎng)基種類、活性炭、植物生長調(diào)節(jié)劑等因素對頭花蓼兩種外植體的愈傷組織誘導(dǎo)及分化的影響，并利用秋水仙素對頭花蓼不同組織或器官進(jìn)行不同誘變處理，旨在探索最佳的誘變途徑和得到純合的四倍體植株。最后對四倍體及二倍體的形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)及抗逆性等特性進(jìn)行分析比較，為頭花蓼育種的研究提供了基礎(chǔ)性

3、資料。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1對頭花蓼兩種外植體消毒處理，篩選出兩組消毒效果最佳:采用70％酒精消毒10s后，分別以0.15％HgCl2處理葉片消毒6min，污染率為16.67％，死亡率為19％;10％NaClO處理莖段消毒9min，污染率和死亡率均為13.33％。
　　2頭花蓼再生體系建立過程中，以莖段作外植體誘導(dǎo)愈傷組織效果較好。通過對不同培養(yǎng)基的培養(yǎng)效果篩選比較，得出MS培養(yǎng)基為最佳培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基中添加

4、6-BA1.0mg/L、NAA0.3mg/L有利于形成愈傷組織，葉片、莖段愈傷組織誘導(dǎo)率分別為73.33％和86.67％; MS中添加6-BA4mg/L、NAA0.2mg/L為最佳增殖配合比。
　　3愈傷組織除正常生長外，會出現(xiàn)褐變、畸形或玻璃化現(xiàn)象，在培養(yǎng)基中添加活性炭對頭花蓼愈傷組織的褐變有抑制作用。其中附加100mg/L活性炭效果最佳，褐變率僅為6.80％，愈傷組織生長和分化效果較好。發(fā)現(xiàn)以6-BA8mg/L和IBA0.1

5、mg/L為激素配比，頭花蓼愈傷組織不定芽誘導(dǎo)效果最佳分化率為83.33％，不定芽平均數(shù)為5.1個，得到了完整的頭花蓼再生植株。
　　4采用秋水仙素作為化學(xué)誘變劑誘導(dǎo)頭花蓼多倍體植株，采用5種方法處理不同組織或器官都可以得到變異株，獲得的變異株均為嵌合體。通過對頭花蓼材料高成活率和高變異率的綜合考慮，發(fā)現(xiàn)浸泡法、預(yù)培養(yǎng)后涂抹法的誘變效果較好，其中以0.2％秋水仙素處理48h變異效果最佳，誘變率為33.33％。
　　5對恢復(fù)生長

6、的變異株進(jìn)行形態(tài)和解剖學(xué)比較，發(fā)現(xiàn)變異株出現(xiàn)莖稈變粗、葉片增厚、表皮毛增多、保衛(wèi)細(xì)胞增大、單位面積內(nèi)氣孔數(shù)減少、上表皮細(xì)胞增大、海綿組織和柵欄組織增厚等性狀，表現(xiàn)出多倍體特有的巨大性。同時采用改良去壁低滲火焰干燥法進(jìn)行染色體數(shù)目統(tǒng)計，變異株的染色體數(shù)目為2n=4x=48，二倍體對照材料染色體數(shù)目為2n=2x=24。
　　6對頭花蓼四倍體和二倍體的部分生理特性進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)四倍體植株有機質(zhì)含量和生理特征均有顯著差異，其中葉綠素含量明