13082.嗜酸氧化硫硫桿菌與嗜鐵鉤端螺旋菌的鎳抗性及機理研究

1、中圖分類號Q窆三坌：窆2UDC579碩士學位論文學校代碼!Q533嗜酸氧化硫硫桿菌與嗜鐵鉤端螺旋菌的鎳抗性及機理研究ThenickeltolerancecapabilityandresistancemechanismofAcidithiobacillusthiooxidansandLeptospirillumferriphilium作者姓名：學科專業(yè)：研究方向：學院(系、所)：指導教師：副指導教師：論文答辯日期)pJ弓s。許瑩微生物學重

2、金屬抗性資源加工與生物工程學院劉學端教授尹華群梁伊麗副教授答辯委員會主畦鞋中南大學二。一三年五月碩士學位論文摘要嗜酸氧化硫硫桿菌與嗜鐵鉤端螺旋菌的鎳抗性及機理研究摘要：嗜酸氧化硫硫桿菌(Acidithiobacillusthiooxidans以下簡稱彳tthiooxidans)和嗜鐵鉤端螺旋菌(Leptospirillumfe，riphilium以下簡稱Lferriphilium)是微生物冶金中常見的兩種浸礦菌，主要分布在pH低、重金屬

3、離子濃度高的環(huán)境中，因此形成了一系列重金屬的抗性機制，對重金屬等毒性離子具有一定的耐受能力。本文研究AtthiooxidansAO1和LferriphiliumYSK這兩株菌在純培養(yǎng)和共培養(yǎng)條件下對鎳離子耐受性的差異。分析鎳離子脅迫下AtthiooxidansA01和LferriphiliumYSK在純培養(yǎng)和共培養(yǎng)條件下細菌的生長情況和與抗鎳相關(guān)的功能基因表達的差異。結(jié)果表明在純培養(yǎng)條件下AtthiooxidansAO1和Lferrip

4、hiliumYSK對鎳的最高耐受濃度分別為300mM和100mM；而在共培養(yǎng)體系中彳tthiooxidansA01和LferriphiliumYSK對鎳的抗性均有所提高。彳六thiooxidansA01在1050mMNi2時仍可以氧化硫單質(zhì)，LferriphiliumYSK在150mM鎳離子濃度下能夠完全氧化Fe2。利用RealtimePCR技術(shù)分析了0mM和lOOmMNi2濃度下純培養(yǎng)和共培養(yǎng)體系細菌的生長變化情況。結(jié)果表明，無外加鎳

5、離子存在時，相對于純培養(yǎng)條件，共培養(yǎng)體系中AtthiooxidansA01的加入使LferriphilumYSK的最高菌體濃度明顯升高，大約是純培養(yǎng)時的2倍。但是純培養(yǎng)條件下，AtthiooxidansA01的最高菌體濃度約是共培養(yǎng)時最高菌體濃度的兩倍，而且其進入對數(shù)生長期的時間比共培養(yǎng)時提前48小時。在100mMNi2濃度下，LferriphilumYSK的存在促進了AtthiooxidansA01的生長，其最高菌體濃度是純培養(yǎng)時的5

6、倍。并且共培養(yǎng)條件下AtthiooxidansA01延滯期更短，比純培養(yǎng)條件下進入對數(shù)生長期的時間提前了48小時。利用RealtimePCR技術(shù)分析Ni2脅迫下AtthiooxidansA01和L店r，iphiliumYSK與鎳抗性相關(guān)的功能基因的表達差異。結(jié)果顯示，在共培養(yǎng)體系中由于AtthiooxidansA01的存在，LferriphiliumYSK一些與抗性相關(guān)的基因比純培養(yǎng)時表達上調(diào)提前了至少16小時。另外，Atthiooxi