15310.5氮雜胞苷誘導煙草brightyellow2細胞程序性死亡

1、學校代碼：10225學號：s13171學位論文5一氮雜胞苷誘導煙草BrightYelloW一2細胞程序性死亡指導教師姓名：申請學位級別：論文提交日期：授予學位單位：孫廣玉教授碩士2013年5月東北林業(yè)大學牟世南東北林業(yè)大學學科專業(yè)：植物營養(yǎng)論文答辯日期：2013年6月授予學位日期：答辯委員會主席：論文評閱人：聾必櫛景大學摘要細胞程序性死亡(programmedceUdea_tll，PCD)，也稱為細胞凋亡，是生物體中的一些細胞通過自身的

2、基因調控的一種主動死亡方式。5氮雜胞苷是一種DNA甲基化抑制劑，能摻入DNA，在DNA復制過程中與DNA分子結合，抑制DNA甲基化轉移酶(DNAmethyltrallsferase，DNMT)，實現去甲基化功能，并能重新激活由于過甲基化而失活的基因，基因組DNA的去甲基化作用使基因組發(fā)生改變，導致生物發(fā)生變異。因此，5一氮雜胞苷(5一Azacytidine)在誘導新物種方面具有重要意義。但是，5一氮雜胞苷抑制DNA甲基化轉移酶，會影響到

3、細胞程序化死亡。在國家自然科學基金項目(30771746)的資助下，本文以5氮雜胞苷(5Azacytidine)處理生長到對數期(3～4d)的煙草BY2(brightyellow2)懸浮細胞，觀察和測定煙草BY2細胞的細胞程序化死亡形態(tài)和生理變化。主要結果如下：1對5氮雜胞苷誘導的BY2細胞進行觀察，發(fā)現隨著時間的延長，植物細胞的凋亡過程經歷了早期，中期，末期的過程。早期凋亡細胞細胞膜皺縮，與細胞壁分離形成間隙，類似與質壁分離狀，細胞核

4、部分邊緣化。中期細胞褶皺程度加大，細胞核凝集成帽形，凝集更為嚴重。末期細胞皺縮加大，胞質渾濁不清，核凝集成小塊。2提取5azac處理后，死亡煙草BV2細胞的DNA進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，DNA降解為大約2~4個核小體的片段，表現出DNALadder現象。進行TUNEL檢測，經過5azac處理的煙草BY2細胞表達出陽性信號。以上兩個結果都是細胞程序性死亡的重要生化特征，由此說明5azac誘導的細胞死亡是細胞程序性死亡，并具有典型的生化特征